KIFC1 抑制剂, AZ82

一种可渗透细胞的吡啶基丙炔基噻吩-羧酰胺化合物，可作为强效、可逆，和 ATP 竞争性药物（K_i = 43 nM）和微管（MT）非竞争性 MT 刺激的 KIFC1 ATPase 活性抑制剂（IC₅₀ = 300 nM）。但是，即使在高浓度（〜100 µM）下，它也不会影响基础 ATPase 的活性。以高亲和力与 MT/KIFC1 复合物（K_d 为 690 nM）结合，并阻断 ATP 结合和 ADP 释放。不与不与 MT 结合的 KIFC 蛋白直接相互作用。在 KIFC1 活性降低 95％ 的浓度（~ 5 µM）下，对一组九种驱动蛋白运动蛋白表现出高度的选择性。在不影响正常细胞的情况下，在中心体扩增的 BT-549 癌细胞中导致有丝分裂延迟、多极纺锤体形成和中心体聚簇。研究表明还可防止 Eg5 抑制诱导的单极纺锤体，并且，浓度为 400 nM 可在 HeLa 细胞中 恢复双极有丝分裂纺锤体的形成。

具有细胞渗透性的吡啶基丙烷基噻吩甲酰胺化合物，对与 MT/微管结合的 KIFC1 马达结构域（Q305-K673；K_d = 690 nM）具有选择性亲和力，但对未复合的 KIFC1 或 MT 不具有选择性亲和力，并选择性抑制 MT 诱导（但不是基础的）KIFC1 马达结构域 ATPase 活性（IC₅₀ = 300 nM；[KIFC1] = 30 nM，[MT] = 100 nM，[ATP] = 15 µM），以 ATP 竞争性方式（K_i = 43 nM；[KIFC1] = 125 nM，[MT] = 1.5 µM）和 MT 非竞争性方式，可有效防止 ADP 释放，但是对其他 9 种驱动蛋白马达蛋白几乎没有效果（5 µM下对其抑制作用<15%或无抑制，包括人CENP-E、染色体驱动蛋白/KIF4A、Eg5、KIFC3、KIF3C、驱动蛋白重链/KIF5B、MCAK/KIF2C、MKLP1/KIF23和构巢曲霉BimC/KIF8）。研究表明，使用 siRNA 敲低 KIFC1 或使用 AZ82（0.4 至 1.2 µM）引起 KIFC1 功能抑制，因为染色体无法聚集，从而导致带有额外中心体的 BT549 细胞中有丝分裂延迟和多极纺锤体形成。在具有正常/两个中心体的细胞中，抑制剂 Eg5导致单极纺锤体形成，而 AZ82 共同处理（400 nM）抵消了 Eg5 的抑制作用（5 nM AZD4877）并恢复有丝分裂 HeLa 细胞的双极纺锤体表型。研究报道了当使用浓度高于 4 µM 时会出现脱靶细胞毒性。

主靶
MT/KIFC1

可逆性：是

细胞可透过性：是

用惰性气体包装

毒性：标准处理（A）

重悬后，等分并冻存（-20°C）。储备液在 -20°C 条件下可稳定保存 3 个月。

参考文献: Wu, J., et al. 2013.ACS Chem. Biol.8, 2201.

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