FITC标记试剂盒

提供了使用荧光素快速、简便地标记抗体或其他蛋白质的方法。一抗的直接标记消除了对二抗的需要，并导致较低的背景和总体较高的信噪比。每个试剂盒足以对每种 100 µg 至 2.5 mg 的蛋白质进行至少五次偶联。

荧光素（五个小瓶），碳酸盐缓冲液浓缩液，DMF 溶剂，PBS 缓冲液浓缩液和说明书。

毒性：多个毒性值，请参阅 MSDS（O）

Calbiochem FITC 标记试剂盒提供了一种快速、简单地用荧光素标记抗体或其他蛋白质的方法。FITC-抗体偶联物可用于许多应用，例如流式细胞术和免疫细胞化学。其他蛋白质（例如类固醇）也可以用 FITC 标记。直接标记一抗，而无需二抗，因此导致较低的背景和总体较高的信噪比。

抗体/蛋白质制备：将 10 ml 碳酸盐缓冲液浓缩液加到 990 ml 蒸馏水中，并在缓冲液中透析抗体过夜。

1.在两个波长下读取 FITC 抗体偶联物的吸光度：280 nm 和 495 nm。使用 1X PBS/0.1％ NaN3 作为分光光度空白对照。偶联蛋白的最佳吸光度读数将在 0.2-1.2 ABS的范围内。

2.使用两个吸光度读数，使用以下等式计算 FITC/蛋白质偶联物的 F/P 摩尔比：<div class="Bio_doc_image">图 1：F/P 摩尔比
</div>

3.有 2 个方程式用于确定 FITC 抗体偶联物的浓度。如果用于偶联的蛋白质是 IgG，请使用以下方程式估算标记抗体的浓度：<div class="Bio_doc_image"><p class="title">图 2：FITC-IgG浓度
</div>如果偶联的蛋白质不是 IgG，请使用以下等式估算偶联蛋白的浓度：<div class="Bio_doc_image">图 3：FITC-蛋白质的浓度
</div>其中 E^0.1% 是未偶联的蛋白的 1 mg/ml 溶液的 A₂₈₀ 读数，在 1 cm 光程长的比色皿中测量。

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