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文件

17-683

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ 乙酰化组蛋白H3(Lys27)- ChIP验证的抗体和引物组

clone CMA309, from mouse

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别名:
H3K27Ac, Histone H3 (acetyl K27), Histone H3K27Ac
UNSPSC代码:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

生物来源

mouse

质量水平

抗体形式

purified immunoglobulin

克隆

CMA309, monoclonal

种属反应性

vertebrates, human

制造商/商品名称

ChIPAb+
Upstate®

技术

ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

同位素/亚型

IgG

NCBI登记号

UniProt登记号

运输

dry ice

一般描述

以前分配的蛋白质标识符Q66I33已合并至P84243。完整的详细资料见于UniProt数据库。
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H3(Lys27)组包括抗乙酰基组蛋白H3(Lys27)抗体,阴性对照抗体(纯化的小鼠IgG)和qPCR引物,可扩增人RPL10基因启动子内的178 bp区域。乙酰基组蛋白H3(Lys27)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证乙酰基组蛋白H3(Lys27)相关染色质的沉淀。
赖氨酸乙酰化是一种动态,可逆和严格调节的蛋白和组蛋白修饰,在染色质重塑和各种细胞功能中基因表达的调节中起主要作用。组蛋白乙酰化通常与转录激活有关,并且在活性增强子上发现H3K27的乙酰化。

特异性

识别Lys27乙酰化的组蛋白H3,Mr 17 kDa。
该肽序列在广泛的动植物物种中是相同的。

免疫原

表位:氨基酸19-37
针对对应于组蛋白H3的氨基酸19-37的合成肽(Lys27乙酰化)制备乙酰基组蛋白H3(Lys27)纯化抗体。

应用

乙酰基组蛋白H3(Lys27)ChIP验证的抗体&引物组,包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K27Ac染色质免疫沉淀。
染色质免疫沉淀:
使用2 µg正常小鼠IgG或抗乙酰基组蛋白H3(Lys27)抗体和Magna ChIP G(目录号17-611)试剂盒,对从HeLa细胞制备的超声染色质(每IP 1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用β-珠蛋白启动子ChIP引物和RPL10启动子引物通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3(Lys27)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)协议以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析:
未处理(泳道1)和丁酸钠处理(泳道2)HeLa细胞的酸提取物通过电泳分离,转移到PVDF膜上,并用抗乙酰基组蛋白H3(Lys27),克隆CMA309(0.1 μg/mL)探测。 使用与HRP偶联的山羊
抗小鼠二抗和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化(请参见图)。
研究子类别
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能

包装

25次测定/试剂盒,约2 μg/染色质免疫沉淀

质量

染色质免疫沉淀:
使用2 µg正常小鼠IgG或抗乙酰基组蛋白H3(Lys27)抗体和Magna ChIP G(目录号17-611)试剂盒,对从HeLa细胞制备的超声染色质(每IP 1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。
使用ChIP引物RPL10启动子通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3(Lys27)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。

目标描述

~17 kDa

外形

形式:纯化
抗乙酰基组蛋白H3(Lys27)(小鼠单克隆IgG1,克隆CMA309)。一个小瓶,包含50 μg蛋白G纯化抗体,溶于含有0.05%钠的50 μL PBS中。储存于-20°C。

正常小鼠IgG。两个小瓶,包含25 μg纯化小鼠IgG,溶于25 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)中。储存于-20°C。

ChIP引物,RPL10启动子。一个小瓶含有75 μL的5 μM人RPL10启动子区域特异性引物。储存于-20°C。
对于:ACC CGT CTT CGA CAG GAC T
REV: GGA ACG GAA GAC GAG AAC AG

储存及稳定性

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装,避免冻融循环。

分析说明

对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人RPL10启动子特异性的对照引物。

法律信息

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免责声明

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