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17-625

Sigma-Aldrich

ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys9) - ChIP免疫沉淀验证抗体和引物试剂套装

from rabbit

别名:

H3K9me3, Histone H3 (tri methyl K9), Histone H3K9me3

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About This Item

UNSPSC代码:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物来源

rabbit

质量水平

100

克隆

polyclonal

种属反应性

human, mouse, vertebrates

制造商/商品名称

ChIPAb+
Upstate®

技术

ChIP: suitable
dot blot: suitable
western blot: suitable

NCBI登记号

NP_003484

UniProt登记号

Q16695

运输

dry ice

基因信息

human ... H3F3B(3021)

相关类别

一般描述

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys9)套装包含抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体、阴性对照抗体（纯化兔IgG）、qPCR引物（用于扩增人ZNF554基因3’端的117bp区域）。三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例，可用于功能性验证三甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的免疫沉淀。
组蛋白的甲基化可以发生在两个不同的残基上：精氨酸或赖氨酸。组蛋白甲基化可以与转录激活或抑制相关，具体取决于甲基化残基。组蛋白H3的赖氨酸9可以通过不同的组蛋白甲基转移酶（HMTs）（例如，SuvH39H1或G9a）单甲基化、二甲基化或三甲基化。该甲基化的赖氨酸可以通过组蛋白脱甲基酶（如JMJD1A，LSD1或JMJD2C）脱甲基。该残基的甲基化主要与转录抑制有关。

特异性

识别赖氨酸9三甲基化的组蛋白H3，分子量(Mr) 17 kDa。
该免疫原序列在广泛的动植物物种中是相同的，因此预期有广泛的交叉反应性。。

免疫原

三甲基组蛋白H3 (Lys9)抗体由含有序列…AR[me3K]S…的BSA标记合成肽免疫制备，其中me3K对应人组蛋白H3的三甲基赖氨酸9。

应用

三甲基组蛋白H3(Lys9)ChIP验证抗体&引物套装，包括ChIP级抗体&PCR特异性对照引物，用于H3K9Me3的染色质免疫沉淀。
染色质免疫沉淀：
采用4 μg的纯化抗体或正常兔IgG和Magna ChIP A试剂盒（货号17-610），对来自2x106个HeLa细胞的、超声制备的染色质进行染色质免疫沉淀。
使用针对人GAPDH启动子的ChIP引物和针对人MyoD启动子的引物，经qPCR鉴定三甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段，验证免疫沉淀成功。
详细实验方案请参阅 EZ-Magna ChIP A（货号17-408）或EZ-ChIP（货号17-371）试剂盒使用方法。

蛋白质印迹分析：
电泳分离重组组蛋白H3（泳道1）和HeLa细胞酸提取物（泳道2），转移至硝酸纤维素膜，用抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(1 μg/mL)检测。通过HRP标记山羊抗兔二抗和化学发光检测系统对蛋白显色（如图）。

Beadlyte组蛋白-肽特异性试验：
将0.5 μg/ml纯化抗二甲基组蛋白H3(Lys9)与具有下列修饰的组蛋白H3肽标记的微珠混合物共同孵育：
1. 三甲基-赖氨酸9
2. 二甲基-赖氨酸9
3. 单甲基-赖氨酸9
4.无修饰H3
过滤去除未结合抗体。将肽-抗体复合物与PE标记的抗兔二抗共同孵育。在Luminex 100仪器上读取荧光。绘制了中值荧光强度（MFI）。

组分

抗三甲基组蛋白H3(Lys9)多克隆抗体，1瓶

ZNF554引物对，1瓶

质量

染色质免疫沉淀：
采用4 µg正常兔IgG或抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP A试剂盒（目录号17-610），对从3x106 NIH3T3 L1细胞超声制备的染色质进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物ZNF554通过qPCR验证了三甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀（请参见图）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna A ChIP（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

目标描述

17kDa

外形

形式：纯化
抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体（兔多克隆IgG）。1小瓶，包含100 μg蛋白A纯化IgG，溶于100 μL 0.02 M磷酸盐缓冲液（pH 7.4）、0.25 M NaCl、0.05%叠氮化钠和30%甘油。 储存于-20°C。

正常兔IgG。1小瓶，包含125 μg正常兔IgG，溶于125 μL储存液（含0.1%叠氮化钠）。储存于-20°C。

ChIP引物，ZNF554。1小瓶，包含75 μL ZNF554基因特定引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向：CGG GGA AAA GCC CTA TAA AT
反向：TCC ACA TTC ACT GCA TTC GT

分析说明

对照
包括阴性对照兔IgG抗体和对ZNF554特异性的对照引物。

法律信息

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

储存分类代码

10 - Combustible liquids

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Dicer independent small RNAs associate with telomeric heterochromatin.
Cao, F; Li, X; Hiew, S; Brady, H; Liu, Y; Dou, Y
RNA null
Polycomb repressive complex 2 regulates normal hematopoietic stem cell function in a developmental-stage-specific manner.
Xie, H; Xu, J; Hsu, JH; Nguyen, M; Fujiwara, Y; Peng, C; Orkin, SH
Cell Stem Cell null
Valérie Grandjean et al.
Development (Cambridge, England), 136(21), 3647-3655 (2009-10-13)
The size of the mammalian body is determined by genetic and environmental factors differentially modulating pre- and postnatal growth. We now report a control of growth acting in the mouse from the first cleavages to the postnatal stages. It was
Chelsea Herdman et al.
PLoS genetics, 13(7), e1006899-e1006899 (2017-07-18)
Transcription of the several hundred of mouse and human Ribosomal RNA (rRNA) genes accounts for the majority of RNA synthesis in the cell nucleus and is the determinant of cytoplasmic ribosome abundance, a key factor in regulating gene expression. The
The many faces of histone lysine methylation.
Lachner, Monika and Jenuwein, Thomas
Current Opinion in Cell Biology, 14, 286-298 (2002)
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