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文件

17-622

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ 三甲基-组蛋白H3(Lys27)- ChIP验证的抗体和引物组

from rabbit, purified by using Protein A

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别名:
Chip Antibody and primer set, H3K27me3 ChIP, H3K27me3, Histone H3 (tri methyl K27), Histone H3K27me3, Histone H3K27me3 ChIP
UNSPSC代码:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

生物来源

rabbit

质量水平

克隆

polyclonal

纯化方式

using Protein A

种属反应性

human, mouse

制造商/商品名称

ChIPAb+
Upstate®

技术

ChIP: suitable
western blot: suitable

NCBI登记号

UniProt登记号

运输

dry ice

基因信息

human ... H3F3B(3021)

一般描述

每批,
每次对全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。
每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys27)组包括抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体,阴性对照抗体(纯化的兔IgG)和qPCR引物,可扩增人α卫星的139 bp区域。三甲基组蛋白H3(Lys27)和阴性对照抗体以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证三甲基组蛋白H3(Lys27)相关染色质的沉淀。
组蛋白的甲基化可以发生在两个不同的残基上:精氨酸或赖氨酸。组蛋白甲基化可以与转录激活或抑制相关,具体取决于甲基化残基。组蛋白H3的赖氨酸27可以通过不同的组蛋白甲基转移酶(例如,EZH2或NSD3)单甲基化、二甲基化或三甲基化(组蛋白H3单甲基Lys27、组蛋白H3二甲基Lys27或组蛋白H3三甲基Lys27)。该残基的甲基化主要与转录抑制有关。

特异性

三甲基组蛋白H3 (Lys27)
预计具有广泛的物种交叉反应性。

免疫原

KLH缀合合成的2X支肽,包含序列...AR(me3K)SAP...,其中me3K对应于人组蛋白H3残基27处的三甲基赖氨酸。
表位:三甲基Lys27

应用

三甲基组蛋白H3(Lys27)ChIP验证的抗体&引物组,包括ChIP级抗体 & 特异性对照PCR引物用于H3K27me3染色质免疫沉淀。
染色质免疫沉淀:
使用4 μg纯化的抗三甲基组蛋白H3(Lys27)抗体或正常兔IgG和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610)对从2x106 HeLa细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用位于人GAPDH启动子侧翼的ChIP引物GAPDH和靶向人MyoD启动子的引物,通过qPCR验证了三甲基组蛋白H3(Lys27)相关DNA片段的成功富集。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZChIP(目录号17-371)试剂盒方案。

蛋白质印迹分析:
重组组蛋白H3(泳道2)和HeLa细胞酸提取物(泳道1)通过电泳分离,转移到硝酸纤维素中,用1:5000稀释的抗三甲基组蛋白H3 Lys27(0.4 μg/mL)进行探测。
使用HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统观察蛋白质(请参见图)。
研究子类别
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能

包装

25次测定/试剂盒,约4 μL/染色质免疫沉淀。

组分

抗三甲基组蛋白H3(Lys27)多克隆抗体,1小瓶

多克隆对照兔血清,1小瓶

人α-卫星引物组,1小瓶

质量

染色质免疫沉淀:
使用4 μg纯化抗体或正常兔IgG和Magna ChIP® A试剂盒(目录号17-610)对从3x106 NIH3T3 L1细胞制备的超声染色质进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物人α-卫星通过qPCR验证了与三甲基组蛋白H3
(Lys27)相关的DNA片段的成功富集(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIP A(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)试剂盒方案。

目标描述

17 kDa

外形

抗-三甲基组蛋白H3(Lys9)(兔多克隆IgG)。一小瓶含有100 μg蛋白A纯化IgG,溶于100 μL缓冲液中,缓冲液含有0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、0.15 M NaCl和0.05%叠氮化钠。储存于-20°C。

正常兔IgG。一瓶含125 μg纯化兔IgG,溶于125 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)。储存于-20°C。

ChIP引物人α-卫星。一个小瓶含有75 μL 5 μM人α卫星特异性的对照引物。储存于-20°C。
对于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC
REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA

储存及稳定性

自发货之日起在-20°C下保存1年

分析说明

对照
1小瓶,含有75 μL的5 μM人α卫星特异性对照引物。储存于-20°C。

用于:CTG CAC TAC CTG AAG AGG AC

REV: GAT GGT TCA ACA CTC TTA CA

法律信息

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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