ChIPAb+ 雄激素受体- ChIP经验证的抗体和引物组

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+ 雄激素受体组包括雄激素受体抗体，正常兔IgG和扩增人前列腺特异性抗原（PSA）增强子区域的85 bp区域的对照引物。雄激素受体抗体和阴性对照以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供，可用于功能性验证雄激素受体相关染色质的沉淀。

雄激素受体（AR）是一种核受体，通过与雄激素睾酮或二氢睾酮结合而被激活。雄激素受体的主要功能是作为调节基因表达的DNA结合转录因子。然而，雄激素受体还具有独立于DNA结合的其他功能。雄激素受体与孕激素受体关系最为密切，较高剂量的孕激素可阻断雄激素受体。

可识别雄激素受体。与雌激素、孕激素或糖皮质激素受体无交叉反应。

人雌激素受体1-21位氨基酸对应的肽（MEVQLGLGRVYPRPPSKTYRG）。

染色质免疫沉淀：
将LNCaP细胞激素饥饿72小时，然后用1 µM CI-4AS-1诱导过夜。 使用1 µg正常兔IgG（产品编号PP64B）或1 µg抗雄激素受体（产品编号CS207339）和Magna ChIP HiSens（目录编号17-10460），对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物，PSA（产品编号CS207379）作为阳性基因座，并使用GAPDH启动子（产品编号22-004）作为阴性基因座，通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅Magna ChIP HiSens（目录号17-10460）或EZ-MagnaChIP HiSens（目录号17-10461）方案以获取实验详细信息。

染色质免疫沉淀：
将LNCaP细胞激素饥饿72小时，然后用载体（未处理）或1 µM CI-4AS-1（处理）诱导过夜。 使用3 µg正常兔IgG（产品编号PP64B）或3 µg抗雄激素受体（产品编号CS207339）和Magna ChIP HiSens（目录编号17-10460），对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物，PSA（产品编号CS207340）通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀，阴性基因座是HNRP2AB1引物组。 报告了报告阳性基因座比阴性基因座富集倍数的Delta Delta Ct计算。
请参阅MagnaChIP HiSens（目录号17-10460）或EZ-MagnaChIP HiSens（目录号17-10461）方案以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析：
该抗体的1:200-1:500稀释液在20 μg人LNCaP细胞的RIPA裂解液中检测到雄激素受体。

免疫沉淀：
代表性批次从500 μg LNCaP RIPA细胞裂解液中免疫沉淀雄激素受体。

免疫细胞化学：
代表性批次的1:50稀释液在用2%甲醛/5%乙酸固定并用0.1%Triton X-100透化的LNCaP细胞中显示出雄激素受体的阳性免疫染色。

ChIPAb+ &雄激素受体组包括&雄激素受体抗体、正常兔IgG & 扩增人前列腺特异性抗原（PSA）增强子区域的85 bp区域的对照引物。

研究子类别
转录因子

研究类别
表观遗传学&核功能

每组25次测定。推荐用于：每个染色质免疫沉淀约1 µg抗体（取决于生物学背景）。

染色质免疫沉淀：
使用1 µg正常兔IgG（产品编号PP64B）或1 µg抗雄激素受体（产品编号CS207339）和Magna ChIP^® HiSens试剂盒（目录编号17-10460），对用激素饥饿（72H）制备超声染色质，然后诱导（1 µM CI-4AS-1）过夜LNCaP细胞（每个IP约1e5细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物，PSA（产品编号CS207340）通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。
有关实验详细信息，请参阅MagnaChIP HiSens（目录号17-10460）或EZ-MagnaChIP HiSens（目录号17-10461）方案。

免疫亲和纯化

抗雄激素受体（兔多克隆），产品编号CS207339。 一个小瓶，含有125 µL（0.2 µg/ µL）纯化的兔多克隆，溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）、150 mM NaCl和0.05％叠氮化钠，然后添加30%甘油的缓冲液中。 储存于-20°C。

正常兔IgG，产品编号PP64B。一个小瓶，包含125 µg（1.0 µg/ µL）兔IgG，溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。 储存于-20°C。

ChIP引物，PSA。产品编号CS207340。一个小瓶，包含75 μL 5 μM每种对人前列腺特异性抗原增强子区域特异的引物。（chr19:51354179+51354263, hg19 build）储存于-20°C。
用于： 5’ GCC TGG ATC TGA GAG AGA TAT CAT C 3’
REV: 5’ ACA CCT TTT TTT TTC TGG ATT GTT G 3’

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议：第一次融化后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融循环，以免损坏IgG和影响产品性能。

对照
包括正常兔IgG和前列腺特异性抗原（PSA）增强子区域特异性引物。

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明，否则我们的产品仅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。