ChIPAb+ JHDM1B抗体

JHDM1B（包含jumonji域的组蛋白去甲基化蛋白1B）和KDM2B。由于存在F-box基序，该蛋白也称为F-box/LRR重复蛋白10（FBXL 10）。该蛋白充当组蛋白H3赖氨酸36的组蛋白脱甲基酶，并优先使二甲基化赖氨酸3脱甲基，而对单甲基化和三甲基化H3赖氨酸36的活性较弱或没有活性。

对每批、每次的全部ChIPab+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+JHDM1B组包括JHDM1B抗体，正常兔IgG和扩增ChIP引物，人β-珠蛋白的110 bp区域的对照引物。JHDM1B和阴性对照以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供，可用于功能上验证JHDM1B相关染色质的沉淀。

对应于人JHDM1B的KLH偶联线性肽。

染色质免疫沉淀：
代表性批次数据。
使用2 µL正常兔IgG或抗JHDM1B和Magna ChIP A试剂盒（目录号17-610），对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 10E6细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物，人β-珠蛋白作为阳性基因座，并使用β-肌动蛋白启动子引物作为阴性基因座，通过qPCR验证了JHDM1B相关DNA片段的成功免疫沉淀。 （图2）。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna ChIP A（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）协议以获取实验详细信息。
蛋白质印迹分析：
代表性批次数据。
用抗JHDM1B（1 ug/mL）探测HeLa核提取物。 使用与HRP偶联的驴抗兔IgG二抗和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化。
箭头表示JHDM1B（~165 kDa）。（图3）。 一些裂解物中约109 kDa处出现一条未表征的条带。
免疫细胞化学分析：
代表性批次数据。
使用抗JHDM1B（红色）对NIH/3T3和HeLa细胞进行共聚焦荧光分析。肌动蛋白丝已用Alexa Fluor 488染料-鬼笔环肽（绿色）标记。细胞核用DAPI（蓝色）染色。该抗体对细胞核进行阳性染色。（图4）。

研究子类别
组蛋白

研究类别
表观遗传学&核功能

该ChIPAb+ JHDM1B -ChIP验证的抗体&引物组方便地包括抗体 & 特异性对照PCR引物。

每组25次测定。推荐用于：每次染色质免疫沉淀约1.4 μg（2 μL）抗体（取决于生物学背景）。

染色质免疫沉淀：
代表性批次数据。
使用2 µL正常兔IgG或抗JHDM1B和Magna ChIP^® A试剂盒（目录号17-610），对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 10E6细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物人β-珠蛋白通过qPCR验证了JHDM1B相关DNA片段的成功免疫沉淀（图1）。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna ChIPA（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

观测值〜165 kDa。在一些裂解液中可以观察到未表征的较低分子量带。

亲和纯化

组分：
抗-JHDM1B（兔多克隆）。 一个小瓶，含有50 µL纯化的兔多克隆，溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）、150 mM NaCl和0.05％叠氮化钠，然后添加甘油至30%的缓冲液中。储存于-20°C。
浓度：0.7 mg/mL
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 µg兔IgG，溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。 储存于-20°C。
ChIP引物，人β-珠蛋白。一个小瓶，包含75 μL人β-珠蛋白启动子特异性引物（5 μM）。储存于-20°C。
用于：AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议：第一次融化后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融，其可能会破坏IgG并影响产品性能。
注意：冷藏室温度变化至低于-20°C时可能导致含甘油的溶液在储存过程中冻结。

对照
包括正常兔IgG和人β-珠蛋白特异性引物。

浓度：请参考批次特异性浓缩物的检验报告。

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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