生物来源
rabbit
质量水平
抗体形式
affinity purified immunoglobulin
抗体产品类型
primary antibodies
克隆
polyclonal
纯化方式
affinity chromatography
种属反应性
mouse, human
制造商/商品名称
Upstate®
技术
ChIP: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable (paraffin)
western blot: suitable
NCBI登记号
UniProt登记号
运输
wet ice
靶向翻译后修饰
citrullination (Arg 3)
基因信息
human ... HIST2H4B(554313)
一般描述
组蛋白H4(UniProt P62805;也称为H4组蛋白家族成员A,组蛋白1 H4a)由人的HIST1H4A(也称为H4/A,H4FA)基因(基因ID 8359)编码。组蛋白H4是主要的组蛋白之一,在原核和真核细胞中都有助于染色质结构。组蛋白H4可以经历影响细胞过程的几种不同类型的表观遗传修饰,包括赖氨酸和精氨酸残基的甲基化和乙酰化,丝氨酸和苏氨酸残基的磷酸化,以及通过肽基精氨酸脱亚氨酶PAD4催化的脱亚氨反应将Arg3转化为瓜氨酸残基,也称为瓜氨酸化)。组蛋白H4 Arg3瓜氨酸化(H4Cit3)由于构象变化和组蛋白H4 N末端正电荷减少而削弱了组蛋白-DNA相互作用。已知细菌感染会刺激嗜中性粒细胞中的H4Cit3,形成高度缩合的细胞外染色质结构网(嗜中性粒细胞胞外陷阱),可以捕获和杀死微生物。另一方面,瓜氨酸化蛋白被识别为非自身蛋白,随后激活免疫系统。已显示PADI4基因的功能性单倍型通过诱导蛋白质的抗原性与类风湿关节炎的发病机理相关。H4Cit3通过p53-PADI4途径响应DNA损伤而被诱导,导致凋亡细胞中位于碎片核周围的H4Cit3免疫反应性上调。此外,H4Cit3水平与非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的p53蛋白表达和肿瘤大小呈负相关,表明H4Cit3在癌变中的关键作用。
特异性
基于100%的序列同源性,预测会与多种物种发生反应。
该兔多克隆抗体在HL-60细胞中检测到PAD4催化的重组组蛋白H4和H2A的Arg3瓜氨酸化,以及钙离子载体诱导的组蛋白H4 Arg3瓜氨酸化(H4Cit3)。细胞PAD4(肽基精氨酸脱亚氨酶4)敲低大大减少了离子载体诱导的H4Cit3,而用免疫原肽阻断抗体阻止了靶条带检测(Tanikawa, C., et al. (2012).Nat. Commun.3:676; Wang, Y., et al. (2004).Science.306(5694):279-283)。
免疫原
对应于人组蛋白H4(去除Met1)的氨基酸1-10(SG[cit]GKGGKGL-C)的KLH缀合的合成肽,其中[cit]表示瓜氨酸化的Arg3。为了缀合目的,添加了C-末端半胱氨酸。
表位:N末端
应用
抗组蛋白H4(瓜氨酸3)抗体(目录号07-596)是一种高度特异性的兔多克隆抗体,靶向组蛋白H4瓜氨酸化(H4Cit3),并已在染色质免疫沉淀(ChIP),免疫细胞化学,免疫组织化学和蛋白质印迹中进行了测试。
研究子类别
组蛋白
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
表观遗传学&核功能
质量
通过蛋白质印迹对HL-60细胞裂解液进行了评估。
蛋白质印迹分析:该抗体的1:1,000稀释液在钙离子载体处理的HL-60细胞的10 µg裂解液中检测到分化诱导的组蛋白H4 Arg3瓜氨酸化(H4Cit3)。
蛋白质印迹分析:该抗体的1:1,000稀释液在钙离子载体处理的HL-60细胞的10 µg裂解液中检测到分化诱导的组蛋白H4 Arg3瓜氨酸化(H4Cit3)。
目标描述
观测值〜12 kDa。计算值 11.24/11.37 kDa(具有/不具有Met1去除的H4)。在一些裂解液中可能会观察到未表征的条带。
外形
亲和纯化。
纯化的兔多克隆抗体,溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
储存及稳定性
自收到之日起,在2-8°C条件下可稳定保存1年。
其他说明
浓度:请参考特定批次的数据表。
法律信息
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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WGK
WGK 1
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Testing null
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