抗乙酰组蛋白H3（Lys18）抗体

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通过免疫印迹法对丁酸钠处理过的HeLa细胞的酸提取物进行了常规评估

使用在ChIP，WB中验证的抗乙酰基-组蛋白H3（Lys18）抗体（兔多克隆抗体）检测乙酰基-组蛋白H3（Lys18），也称为H3K18Ac，组蛋白H3（乙酰化K18）。

染色质免疫沉淀：
代表性批次数据。
使用2 µL正常兔血清或2 µL抗乙酰化组蛋白H3（Lys18）和Magna ChIP A试剂盒（目录号17-610），对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 10e6细胞当量）进行染色质免疫沉淀。 使用对人GAPDH启动子区域特异的对照引物作为阳性基因座，并使用β-珠蛋白引物作为阴性基因座，通过qPCR验证了乙酰基组蛋白H3（Lys18）相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅EZ-Magna ChIP A（目录号17-408）或EZ-ChIP（目录号17-371）协议以获取实验详细信息。

ChIP测序：
代表性批次数据。使用Magna ChIP HiSens试剂盒（目录号17-10460），2 μL抗乙酰化组蛋白H3（Lys18）抗体（目录号07-354），20 µL蛋白A/G珠和1e6交联 HeLa细胞染色质进行染色质免疫沉淀，然后使用磁珠进行DNA纯化。使用标准规程从Input和ChIP DNA样品制备文库，带Illumina条形码适配器，并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除 TagDust（http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource）标签后，使用 Bowtie（http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml）映射了FastQ文件中的超过1000万次读取。使用 MACS（http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/）识别峰，并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser（http://genome.ucsc.edu）中以自定义轨道的形式显示峰和读数。

蛋白质印迹分析：
代表性批次数据。
用抗乙酰基组蛋白H3（Lys18）（1:10,000稀释度）探测重组组蛋白H3（泳道1，目录号14-494）以及丁酸钠处理（泳道2）和未处理（泳道3）HeLa细胞（目录号17-305）的酸提取物。
箭头表示乙酰基组蛋白H3（Lys18）（17 kDa）。

斑点印迹：
代表性批次数据。
将40 ng和4 ng量的不同修饰的组蛋白肽（见表1）转移至PVDF膜上，并用抗乙酰基组蛋白H3（Lys18）抗体（1:5000稀释度）进行探测。使用与HRP偶联的山羊抗兔IgG和化学发光检测系统可视化蛋白质。显示了60秒曝光的图像。

识别赖氨酸18乙酰化的组蛋白H3。

组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的5种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴，其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。



组蛋白H3的乙酰化发生在组蛋白尾部的几个不同的赖氨酸位置，并由称为组蛋白乙酰基转移酶（HATs）的酶家族完成。

17 kDa

KLH缀合的合成肽（GKAPRAcKQLASK-C），对应于在赖氨酸18上乙酰化的酵母组蛋白H3的氨基酸13-23，并添加了C端半胱氨酸便于进行缀合。

替代：04-1107

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

含有0.05%叠氮化钠和30％甘油的100 μL兔血清。