抗-二甲基组蛋白H3（Lys4）抗体，克隆CMA303

组蛋白是高度保守的蛋白质，可作为将核DNA组织成染色质的结构支架。H2A，H2B，H3和H4这四个核心组蛋白组装成一个八聚体（每个分子2个分子）。随后，146个碱基对的DNA被包裹在八聚体周围，形成核小体。组蛋白在翻译后被修饰；而这些修饰调节DNA转录、修复、重组和复制。最常研究的修饰是乙酰化，磷酸化，甲基化和泛素化。修饰主要发生在延伸到核小体核心颗粒之外的N末端和C末端尾巴上。二甲基赖氨酸4组蛋白H3（H3K4me2）是转录激活染色质标记，二甲基组蛋白H3 Lys4（H3K4me2）从具有DNA甲基化的区域中耗尽。多能造血细胞具有差异甲基化的基因子集（H3K4me2+/me3-）。这些基因在转录上是沉默的，并且在谱系特异性造血基因中高度富集，表明H3K4甲基化在分化中的作用。

基于序列相似性，预期具有广泛的物种交叉反应。

该抗体可特异性识别Lys4上二甲基化的组蛋白H3。抗体结合特异性允许对Thr3进行磷酸化和/或对Lys91进行修饰。

对应于人组蛋白H3的1-12位氨基酸的合成肽，在Lys4上二甲基化，与KLH偶联。

表位：二甲基化Lys4

染色质免疫沉淀：
使用2 µg正常小鼠IgG或抗二甲基组蛋白H3（Lys4）抗体和Magna ChIP g（目录号17-611）试剂盒，对从HeLa细胞制备的超声染色质（每IP 1 X 106细胞当量）进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物GAPDH编码通过qPCR验证了二甲基组蛋白H3（Lys4）相关DNA片段的成功免疫沉淀。
有关实验详细信息，请参阅EZ-Magna G ChIP（目录号17-409）或EZ-ChIP（目录号17-371）方案。

斑点印迹分析：
用抗二甲基H3（Lys4），克隆CMA303（目录号05-1338，浓度为2.0 µg/mL，稀释度为1:500）探测含有具有各种修饰的组蛋白肽的AbSurance组蛋白H3抗体特异性阵列（目录号16-667）和AbSurance组蛋白H2A，H2B，H4抗体特异性阵列（目录号16-665）。 使用与HRP偶联的驴抗小鼠IgG和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化。

ChIP-seq分析：
使用Magna ChIP HiSens试剂盒（目录#17-10460），2 µg抗二甲基组蛋白H3（Lys4）抗体（目录#05-1338），20 µL蛋白A/G珠和1e6交联的HeLa细胞染色质进行染色质免疫沉淀，然后使用磁珠进行DNA纯化。使用标准规程从Input和ChIP DNA样品制备文库，带Illumina条形码适配器，并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除TagDust（http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource）标签后，使用Bowtie（http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml）映射了FastQ文件中的超过1600万次读取。使用MACS（http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/）识别峰，并从BigWig和BED文件在UCSC Genome Browser（http://genome.ucsc.edu）中以自定义轨道的形式显示峰和读数。在04-790和05-1338数据集中识别出的最高25％峰与HeLa S3的ENCODE H3K4me2 BROAD组蛋白轨迹中识别出的峰有92和90%重叠。

免疫细胞化学：
该抗体已由外部实验室证明适用于免疫细胞化学。

免疫沉淀：
该抗体已由外部实验室证明适用于免疫沉淀。

ELISA：
外部实验室已证明该抗体适用于ELISA。

多路复用：
该抗体可通过Luminex测定特异性识别Lys4上二甲基化的组蛋白H3。

抗二甲基化组蛋白H3（Lys4）抗体（克隆CMA303）是用于检测二甲基化组蛋白H3（Lys4）（也称为H3K4me2，组蛋白H3（二甲基K4））的小鼠单克隆抗体。在ChIP、DB、ELISA、ICC、IP、WB、Mplex中证明其性能。

研究子类别
组蛋白

研究类别
表观遗传学&核功能

已通过蛋白质印迹法对Hela酸提取物进行了常规评估。

蛋白质印迹分析：该抗体的2 μg/mL（1:500）稀释液在10 μg HeLa酸提取物上检测到二甲基化组蛋白H3（Lys4）。

大约17 kDa

在含0.05%叠氮化钠的PBS中κ的纯化小鼠单克隆IgG1。

形式：纯化

蛋白G纯化

自收到之日起，在2-8°C条件下可稳定保存1年。为了最大程度地回收产品，在取下盖子之前，将原始样品瓶进行离心。避免反复冻融，其可能会破坏IgG并影响产品性能。

对照
HeLa酸提取物裂解液

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

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