RIPAb+ IGF2 mRNA-结合蛋白3-RIP经验证的抗体和引物组

使用RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）测定法评估RipAb+抗体。 每个RIPAb+抗体组均包含阴性对照抗体，以确保RIP反应的特异性，并确认了与目标免疫沉淀RNA结合蛋白特异性相关的RNA的共免疫沉淀。在适当的情况下，RIPAb+组还包括定量RT-PCR对照引物（RIP引物），通过成功共沉淀特定的RNA靶标（例如信使RNA）来生物学验证IP结果。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在实验环境中使用抗体时验证RIP方案。如果未提供靶标特异性测定法，则使用基于自动微流体的测定法通过在对照免疫沉淀上富集可检测的RNA来验证RipAb+试剂盒。
IGF2mRNA结合蛋白3包含几个KH结构域，这在RNA结合中很重要，并且已知参与RNA合成和代谢。

该抗体在C端识别IGF2 mRNA结合蛋白3。

对应于C末端及其周围的人IGF2mRNA结合蛋白3的KLH偶联线性肽。

表位：C端

来自RIP裂解液的免疫沉淀：
代表性批次数据。
使用5 µg正常兔IgG（目录号PP64B）或5 µg抗-IGF2mRNA结合蛋白3抗体（目录号CS207310）对来自HeLa细胞的RIP裂解液（每个IP约2 X 10E7细胞当量）进行免疫沉淀。10%的沉淀蛋白（泳道1：兔IgG，泳道2：IGF2 mRNA结合蛋白3）通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上，并用抗IGF2 mRNA结合蛋白3抗体（目录号CS207310，1:1000）探测。使用一步 IP-Western试剂盒（GenScript目录号L00231）可视化蛋白质。箭头指示IGF2 mRNA结合蛋白3。泳道2中的较低条带对应于亚型2。
蛋白质印迹分析：
代表性批次数据。
HEK293细胞裂解液通过电泳分离，转移至PVDF膜上，并用IGF2BP3（1:2,000）稀释液进行探测。 使用与HRP偶联的驴抗兔蛋白可视化，并使用化学发光检测系统可视化。
箭头表示IGF2BP3（~64 kDa）。

研究子类别
生长因子&受体

RNA代谢 & 结合蛋白

研究类别
表观遗传学&核功能

经RipAb+ IGF2 mRNA结合蛋白3-RIP验证的抗体&引物组方便地包含抗体&特异性对照PCR引物。

每组10次测定。推荐用于：每个RIP约5 μg抗体（取决于生物学背景）。

RNA结合蛋白免疫沉淀：
代表性批次数据。
使用5 µg正常兔IgG或5 µg抗IGF2 mRNA结合蛋白抗体和Magna RIP^® RNA结合蛋白免疫沉淀试剂盒（目录号17-700）对从HepG2细胞制备的RIP裂解液（每个IP 2 X 10E7细胞当量）进行免疫沉淀。
使用RIP引物IGF2通过qPCR确认IGF2 mRNA结合蛋白3相关RNA的成功免疫沉淀（图1）。
有关实验详细信息，请参阅Magna RIP（目录号17-700）或EZ-Magna RIP（目录号17-701）方案。

观测值为64 kDa。 预测会与IGF2BP3的所有亚型发生交叉反应。

亲和纯化

抗IGF2 mRNA结合蛋白3（兔多克隆）。一瓶含有75 μL亲和纯化的兔多克隆抗体，溶于含0.09%叠氮化钠和30%甘油的PBS中。储存于-20°C。浓度：0.7 mg/mL
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 μg兔IgG，溶于125 μL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。 在-20°C下储存。
RIP引物#IGF，部件# CS207311。
一个小瓶，包含75 μL 5 μM人IGF2 mRNA特异性引物。储存于 -20°C。
用于：GCG GCT TCT ACT TCA GCA G
REV: CAG GTG TCA TAT TGG AAG AAC

自收到之日起，在-20°C条件下可稳定保存1年。
处理建议：收到后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于 -20°C。避免反复冻融，其可能会破坏IgG并影响产品性能。注意：冷藏室温度变化至低于-20°C时可能导致含甘油的溶液在储存过程中冻结。

对照
包括阴性对照正常兔IgG抗体和人IGF2 cDNA特异性对照引物。

浓度：请参考批次特异性浓缩物的分析证书。

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明，否则我们的产品仅供研究使用，不得用于任何其他目的，包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。