细胞又被污染了?
教你一招搞定细胞实验!
细胞培养实验需要无菌的环境,过滤是主要除菌方法,这就要求用于实验的滤器既要是无菌的,又要有很好的截留率。当然,同时能做到高效又低吸附,那才算完美。
无菌滤器到底要如何选择?如何选到合适又好用的滤器?有没有相关的指南参考呢?
默克Millipore®致力于过滤技术与产品60余年,总结了无菌滤器选择的“321原则”,帮忙大家一分钟搞定无菌滤器选择,搞定细胞实验!
选择Millex®针式滤器首要考虑的三个要素:滤膜材质,直径,孔径。有了它们可以解决您至少80%滤器的选择。
滤膜材质的选择:
主要考虑的因素是化学兼容性及流体的性质,取决于待过滤的样品溶剂和滤膜的物理化学性质。
• PVDF(黄):低蛋白吸附,水溶液和温和有机溶液过滤
• PES(绿):过滤速度快,蛋白吸附低,水溶液过滤
• MCE(深蓝):应用广泛的水溶液过滤
• 疏水性PTFE(白):出色溶剂耐受性,100%有机溶剂和气体过滤
• 亲水性PTFE(白):化学兼容性广,水溶液和有机溶剂过滤
过滤直径的选择:
主要考虑因素是过滤样品的体积,兼顾过滤速度和耐压性,直径越大,过滤速度越快,耐压越好。
• 50mm:最大5L
• 33mm:10-200ml
• 25mm:10-100ml
• 13mm:1-10ml
• 4mm: < 1ml
滤膜孔径的选择:
主要考虑的因素是过滤目的,无菌过滤中常用的孔径是0.2µm 或 0.45µm。
• 除支原体:< 0.1µm
• 除菌过滤: < 0.2µm
• 小颗粒去除: < 0.45µm
• 澄清或预过滤: > 0.45µm
选择Millex®针式滤器兼顾考虑的两个方面:滤膜特性和滤壳材质,以此来保障我们选择到合适的滤器。
滤膜特性:
主要结合待过滤样品的性质,考虑与滤膜的物理和化学性质间的相互作用。
• 低溶出:过滤环节不能引入新的杂质;推荐PVDF,PES,PTFE
• 低吸附:过滤环节样品不能有损失;推荐PVDF,PTFE,
• 低蛋白吸附:对蛋白的特异性吸附低;推荐PVDF
• 高通量:单位时间内过滤更多样品;推荐PES
滤壳材质:
主要考虑滤壳与过滤溶液间的化学兼容性,化学兼容性越广,溶出越低,干扰越少。
• 聚丙烯PP:++++
• 高密度聚乙烯HPDE:+++
• 改性丙烯酸MA: ++
• 聚氯乙烯PVC:+
对于无菌过滤,滤液的溶剂相对温和,所以滤壳的材质要求不高。
选择Millex®针式滤器是否需要考虑的特殊因素,如滤器的灭菌方法,滞留体积等,以达到不同的实验要求。
• 灭菌方法:EO环氧乙烷,RS辐射灭菌等
• 滞留体积:与滤器直径和固膜方式有关。固膜方式相同,直径越小,滞留体积越少
以上就是无菌针式滤器的选择指南,您get到了吗?相比分析滤器的选择,产品层面,它们有共同点;基于不同的应用要求,又有不同点,如果都有涉及,可以对比来看。
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