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主页干货资讯细胞又被污染了?掌握这个方法,教你一招搞定细胞实验!

细胞又被污染了?
教你一招搞定细胞实验!


细胞培养实验需要无菌的环境,过滤是主要除菌方法,这就要求用于实验的滤器既要是无菌的,又要有很好的截留率。当然,同时能做到高效又低吸附,那才算完美。

无菌滤器到底要如何选择?如何选到合适又好用的滤器?有没有相关的指南参考呢?

默克Millipore®致力于过滤技术与产品60余年,总结了无菌滤器选择的“321原则”,帮忙大家一分钟搞定无菌滤器选择,搞定细胞实验!

 

选择Millex®针式滤器首要考虑的三个要素:滤膜材质,直径,孔径。有了它们可以解决您至少80%滤器的选择。

滤膜材质的选择:

主要考虑的因素是化学兼容性及流体的性质,取决于待过滤的样品溶剂和滤膜的物理化学性质。

•         PVDF(黄):低蛋白吸附,水溶液和温和有机溶液过滤

•         PES(绿):过滤速度快,蛋白吸附低,水溶液过滤

•         MCE(深蓝):应用广泛的水溶液过滤

•         疏水性PTFE(白):出色溶剂耐受性,100%有机溶剂和气体过滤

•         亲水性PTFE(白):化学兼容性广,水溶液和有机溶剂过滤

过滤直径的选择:

主要考虑因素是过滤样品的体积,兼顾过滤速度和耐压性,直径越大,过滤速度越快,耐压越好。

•         50mm:最大5L

•         33mm:10-200ml

•         25mm:10-100ml

•         13mm:1-10ml

•         4mm: < 1ml

滤膜孔径的选择:

主要考虑的因素是过滤目的,无菌过滤中常用的孔径是0.2µm 或 0.45µm。

•         除支原体:< 0.1µm

•         除菌过滤:  < 0.2µm

•         小颗粒去除:  < 0.45µm

•         澄清或预过滤:  > 0.45µm

选择Millex®针式滤器兼顾考虑的两个方面:滤膜特性和滤壳材质,以此来保障我们选择到合适的滤器。

滤膜特性:

主要结合待过滤样品的性质,考虑与滤膜的物理和化学性质间的相互作用。

•         低溶出:过滤环节不能引入新的杂质;推荐PVDF,PES,PTFE

•         低吸附:过滤环节样品不能有损失;推荐PVDF,PTFE,

•         低蛋白吸附:对蛋白的特异性吸附低;推荐PVDF

•         高通量:单位时间内过滤更多样品;推荐PES

滤壳材质:

主要考虑滤壳与过滤溶液间的化学兼容性,化学兼容性越广,溶出越低,干扰越少。

•         聚丙烯PP:++++

•         高密度聚乙烯HPDE:+++

•         改性丙烯酸MA: ++

•         聚氯乙烯PVC:+

对于无菌过滤,滤液的溶剂相对温和,所以滤壳的材质要求不高。

选择Millex®针式滤器是否需要考虑的特殊因素,如滤器的灭菌方法,滞留体积等,以达到不同的实验要求。

•         灭菌方法:EO环氧乙烷,RS辐射灭菌等

•         滞留体积:与滤器直径和固膜方式有关。固膜方式相同,直径越小,滞留体积越少

 

以上就是无菌针式滤器的选择指南,您get到了吗?相比分析滤器的选择,产品层面,它们有共同点;基于不同的应用要求,又有不同点,如果都有涉及,可以对比来看。

 

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