蛋白电泳染色剂选择指南

• 蛋白染料和染色剂选择图表
• 蛋白质染色应用

蛋白染料和染色剂选择图表

多样的蛋白分析方法相应地需要匹配丰富的蛋白可视化（染色）试剂。EZBlue™和ProteoSilver™试剂专为蛋白质组学而设计，不过在传统的PAGE技术中表现依然出色。

按照下表为您的应用选择最适合的试剂来优化蛋白质检测。

蛋白质染色应用

阿尔新蓝 8GX

一种阳离子染料，会与酸性糖胺聚糖形成不溶性复合物，因此可用于糖胺聚糖的定量检测。它用于骨和软骨、鼠间充质祖细胞(MPC)结节中硫酸蛋白多糖和牛关节软骨细胞中硫酸蛋白多糖的染色。

氨基黑 (AB)

一种酸性染料，可检测聚偏二氟乙烯(PVDF)和硝酸纤维素膜中50 ng级的蛋白浓度。氨基黑能使低浓度蛋白显色，并可染色指纹中的血液蛋白，适于法医学应用。

亮蓝G

基于甲醇的染色剂，特别设计用于聚丙烯酰胺凝胶染色，但也可染色琼脂糖凝胶(IEF)。染色剂中含有甲醇和乙酸，因此凝胶在染色前不需要固定。也用于显微镜载玻片上的细胞蛋白染色。

亮蓝R染色液

专门用于琼脂糖凝胶和Ouchterlony凝胶中的蛋白质染色。染色剂中含有乙醇和乙酸，因此凝胶在染色前不需要固定。 

伊红 Y

二钠盐已被用作免疫细胞化学和免疫组织化学的复染剂。伊红 Y 是一种黄原染料，用于结缔组织和细胞质的鉴别染色。在组织病理学中，它在苏木精后和亚甲蓝之前用作复染剂。它还用作背景染色剂，从而与核染色剂形成对比。

EZBlue™ 凝胶染色试剂

方便、灵敏的胶体蛋白染色剂，在显著减少染色时间的同时，改善了蛋白电泳结果。作为胶体染色剂，它只与蛋白质反应，而不与凝胶本身反应。背景染色减少，因此蛋白条带几乎可以立即显示出来。无需脱色步骤，尽管水洗可能会加强条带并澄清背景。EZBlue^®染料极为灵敏，可检测低至5 ng的蛋白质。

固绿 FCF

一种生物相容性三芳基甲烷染料。固绿FCF染料用于IEF、天然PAGE和SDS-PAGE中的蛋白质染色。固绿染色在较宽的蛋白浓度范围内呈线性。电泳过后，把蛋白质固定在胶上染色更加灵敏。  可以用30%(v/v)乙醇、10%(v/v)乙酸或7%乙酸对凝胶进行脱色。可以在 625nm 处扫描染色的凝胶。检测灵敏度约为考马斯亮蓝R的30％。固绿FCF已用于兔半月板和骨软骨组织的染色。

固定溶液

一种用于染色前蛋白固定的高效溶液，适于SDS-PAGE、非变性PAGE和IEF。蛋白需要固定在凝胶上，以防电泳后蛋白从凝胶上脱出。 

糖蛋白检测试剂盒

用于对聚丙烯酰胺凝胶及膜上的糖蛋白进行选择性染色的试剂盒，使用了改良的过碘酸希夫(PAS)法。对糖蛋白中糖基团的染色会在无色本底中得到品红色条带。过碘酸/希夫试剂可对常见于外周糖类及唾液酸中的邻二醇基团进行染色。 

胶体金

用于在电镜中标记蛋白和多糖。还可作为通用染料，用于硝酸纤维素膜斑点上或电泳后聚丙烯酰胺凝胶印迹上的固定蛋白染色。

油红 O 染色剂

适合作为醋酸纤维素膜的脂质/脂蛋白染色剂。染料在染色过程中开始沉淀。染色后(1 h)，用甲醇：甘油(1:3)溶液使膜脱色。常见文献引用与琼脂糖一起使用。

Ponceau S

一种重氮染料的钠盐。丽春红S染色剂为即用型试剂，用于快速（5分钟）染色硝酸纤维素膜或PVDF膜（蛋白质印迹）上的蛋白条带，也染色醋酸纤维素膜上的蛋白质。硝酸纤维素和PVDF上的丽春红染色是可逆的，可通过0.1M NaOH冲洗染色膜1分钟脱色。 

ProteoSilver™银染试剂盒

一种性能稳定、极为灵敏的染色试剂盒。该试剂盒含有制备好的银染试剂，并配有如何获得最佳结果的详细说明。ProteoSilver的检出限为0.1 ng/mm²的蛋白质(BSA)，本底极低，可对低丰度蛋白进行出色的检测。

ProteoSilver™ Plus银染试剂盒 

与ProteoSilver™银染试剂盒（见上文）类似。ProteoSilver™ Plus也可用于MALDI-MS检测，其不含会使赖氨酸残基发生交联的戊二醛，该成分会导致质谱结果失准。ProteoSilver™ Plus银染试剂盒另外含有两种可使切离蛋白斑点脱色的试剂，适于希望通过胰蛋白酶消化和MALDI-MS分析来进一步研究蛋白特性的研究人员。

用于膜和聚丙烯酰胺凝胶的可逆蛋白质检测试剂盒

一种设计用于对尼龙、硝酸纤维素膜、PVDF膜或PAGE凝胶上的蛋白进行染色的独特检测系统，具有与考马斯蓝染色剂相似的检测灵敏度。染色可通过EDTA溶液轻松实现逆转，因此印迹可重复用于免疫印迹或氨基酸序列分析(PVDF)。试剂盒不含有毒的二甲胂酸和亚铁氰化钾。

苏丹黑 B

用于磷脂和细胞内脂质染色。染色模式与髓过氧化物酶反应相似，对粒细胞、嗜酸性粒细胞阳性染色，对单核细胞弱染色。苏丹黑 B 将磷脂染为灰色，将中性脂肪染为蓝黑色。

SYPRO^® Orange

与SYPRO^® Red相似，但它颜色更亮一些，背景荧光略高。对于使用激光激发凝胶扫描仪的用户，推荐使用基于氩离子激光的仪器扫描SYPRO^® Orange。该染料可由紫外线或宽带照明光有效激发。它不适用于印迹或IEF凝胶中蛋白的染色，并在2维凝胶染色中显示出较低的灵敏度。

SYPRO^® Ruby

蛋白凝胶染色剂是一种即用型、超灵敏的发光染色剂，用于检测聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离的蛋白。该染色剂专为双向PAGE设计，但也可用于单向PAGE和等电聚焦(IEF)凝胶。SYPRO^® Ruby蛋白凝胶染色剂具有与多种银染技术相当的灵敏度。