揭秘!
快速检测氨基酸的方法
液质联用技术(LC-MS)具有复杂样品分离能力,高灵敏度等优势,目前在药物、食品、质检等行业应用越来越广泛。本应用概述了一种LC-MS/MS方法,用于分析所有20种氨基酸,以往使用高效液相色谱检测氨基酸时,待测样品需要衍生化,且衍生步骤繁琐,操作复杂,耗时较长。本应用特点在于所检测20种氨基酸,均无需衍生化。
色谱条件
色谱柱:Super™Carbon LC, 10cm x 2.1 mm I.D, 2.7 μm;
流动相:[A]水(0.1% (v/v) 二氟乙酸(DFA));[B]乙腈(0.1% (v/v) 二氟乙酸(DFA));
梯度:
时间 (min):0、7、12、12
流动相A (%):100、100、95、0
流动相 B (%):0、0、5、100
流速:0.2 mL/min;
柱温:12°C;
检测器:MSD;
进样量:1.0 μL;
样品:不同浓度的氨基酸混合物;
稀释剂:水(0.1% (v/v)二氟乙酸(DFA))
结果
如获取结果可关注默克生命科学公众号
结论
该应用证明了利用LC-MS/MS技术采用对应级别的溶剂和试剂,配合Super™Carbon LC色谱柱,在不需要衍生化试剂的情况下,仍可用于20种氨基酸的检测,避免了衍生化/未衍生化氨基酸的存在以及衍生化试剂本身的干扰,且与大多数商业方法相比,耗时更短。
实验小窍门
在LC-MS检测中,流动相溶剂中存在的痕量杂质,也可能增加LC-MS的背景噪音,从而降低仪器对分析
物的检测能力。选择LC-MS配置流动相的高纯溶剂与试剂,具有超高纯度、超低金属杂质、超高紫外线透射率、超低蒸发残留、超低杂质含量等特点,几乎对基线无干扰,可减少LC-MS仪器的背景噪音。
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