跟甲醇说拜拜，
PVDF转印膜还能如此操作

蛋白质印迹( Western Blotting ，简称 WB) ，是一种常用的蛋白检测和定量的技术，它可以从复杂的蛋白混合物中分离和检测某种特定的目标蛋白，已成为非常经典、有效的蛋白研究方法，80%以上的蛋白实验室都会用到。

然而，WB操作并没有那么简单，经常被调侃为一种“玄学”，一不小心很容易出现问题，比如信号弱、背景高、各种奇葩条带等。其实WB实验有很多诀窍，比如选择合适的转印膜等，掌握了这些，就离WB老司机不远了。

转印膜的发展
WB实验方法最早出现于1979年，在四十多年的发展过程中，核心试剂的发展不断促进着WB技术的改进。其中，转印膜的更新迭代对WB实验的性能优化，起着非常关键的作用。

WB技术建立之初，参考了Sothern blotting的方法，使用硝酸纤维素(NC)转印膜作为介质。虽然NC膜具有亲和力高、背景低等特点，但NC膜脆而易碎，在很多WB应用场景中存在诸多局限性。

直到1985年，默克推出了PVDF转印膜，其蛋白载量更高，韧性好，显著提高了WB检测的灵敏度和成功率，也可以支持多轮剥离和杂交，更高效的获得更多数据。从此，WB逐渐成为检测蛋白表达的经典、有效的技术方法。

PVDF转印膜的选择
为了满足客户更多特殊需求，默克也在不断创新，推出多种PVDF转印膜系列。大家可以根据目的蛋白分子量、蛋白丰度、后续检测方法、操作需求等选择不同的PVDF膜。

不同PVDF转印膜对比：
常用的是默克经典PVDF膜，Immobilon®-P，0.45μm孔径，可满足大多数应用需求，文献引用近万篇；低丰度蛋白、或低分子量蛋白/多肽等检测，推荐0.2μm的改良PVDF膜，载量更高；如果进行荧光检测，推荐Immobilon-FL改良PVDF膜，可显著提升信噪比。

除此之外，还可以选择不同的产品形式，比如：
● 经典卷膜：9,937.5 cm2，高性价比
● 半卷膜：用量少选择小规格，不浪费
● 卷筒膜：一步剪裁，无边角浪费
● 预切膜：无需裁剪，方便高效
● 三明治：滤纸和预切膜片预组装

WB技术进入新时代无需甲醇润湿PVDF膜
PVDF膜已广泛应用于多种WB场景，但PVDF膜需要甲醇润湿激活，不环保、也不太方便。为了进一步改善WB技术，默克研发出了目前市场上唯一无需甲醇激活的改良PVDF膜，Immobilon®-E。

Immobilon®-E即用型PVDF膜，转印前无需甲醇溶液预润湿，可直接使用标准转印缓冲液。与NC膜相比，它有PVDF膜的优势，包括更好的操作性能和染色能力、强溶剂抗性和高信噪比，因此具有更高的灵敏度。

Immobilon®-E 即用型转印膜孔径为0.45μm，是大多数Western 免疫印迹的理想之选。

● 更安全方便：不需要高浓度甲醇预润湿、操作类似NC膜
● 应用更广泛：低丰度蛋白/常规检测，湿转/半干转等
● 物化性能好：柔韧易操作，试剂兼容性好，适于长时间存放
● 支持重复检测：性能稳定，可进行多次抗体剥离和再杂交

Immobilon®-E具有与NC膜的非预润湿特点，也有与-P同样的检测灵敏度，操作方便安全，同时保障了低丰度蛋白的检测成功率。