KiCqStart® SYBR® Green引物常见问题
KiCqStart®引物(货号KSPQ12012)支持所有热循环仪,是可直接订购的预设计引物对,用于通过 SYBR Green I RT-qPCR(逆转录定量实时 PCR)定量基因表达。为了符合MIQE标准,这类引物利用复杂的生物信息学工具进行开发,并通过算法验证以避免脱靶扩增。KiCqStart®引物可提供最多三组正向和反向引物对的选择,适用于常见模式生物的所有基因。
KiCqStart®引物缘何符合MIQE标准?
除其他功能外,还可在购买之前或之后提供寡核苷酸的外显子位置、序列和数量。
典型的扩增子大小是多大?
大多数扩增子在75到200 bp之间。
KiCqStart®引物可检测所有剪接变异吗?
不能。基于文献综述,引物对用于检测每种真核基因中最普遍的剪接变异。然而,引物对可能共扩增其他转录物。
如何找到目标剪接变异?
利用引物对RefSeq在GenBank中进行搜索。
如何找出特定的剪接变异?
利用引物对RefSeq在GenBank中进行搜索。
KiCqStart®引物可用于基于探针的RT-qPCR吗?
不能,该引物对专门用于 SYBR® Green I检测化学。
可以使用KiCqStart®引物检测基因组DNA吗?
不能,该引物专门用于检测mRNA转录物及其相应的cDNA。然而,排序4的引物对也可共扩增污染的基因组DNA。
我在哪里可以找到序列信息?
序列信息将在每个引物对发货时附带的技术数据单页中提供。
KiCqStart®引物是否配有任何其他反应成分,例如缓冲液?
没有,其仅包括一个正向和一个反向引物,干燥后置于单个管中。
我的人类基因的KiCqStart®引物是否也可用于小鼠同源物?
可能可以,但引物对是按照物种特异性被设计的。
在设计过程中,哪些“omes”作了脱靶搜索参考?
转录组和基因组。
在设计过程中,扩增子是否检查了二级结构?
取决于物种,我们队扩增子和/或引物进行了检测。
我如何发表成果中引用该产品?
最好提及物种、基因、基因ID、引物对(1,2或3)。利用引物对RefSeq在GenBank中进行搜索。
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