内切核酸酶
核酸内切酶可将 DNA 和 RNA 切割成更小的片段,从而降低生物工艺工作流程和研究应用中的核酸污染物含量。尽管核酸内切酶存在多种天然来源,但这类制剂可能含有蛋白酶活性和病毒污染物,带来挑战。
Benzonase®核酸内切酶是一种来自粘质沙雷氏菌的基因工程核酸酶,消除了天然来源核酸内切酶相关的风险,并且可以降解所有形式的 DNA 和 RNA。在适当的反应条件下使用时,Benzonase®核酸内切酶会将所有形式的 DNA 和 RNA(单链、双链、线性和环状)切割为长度约为 3 至 5 个碱基对的寡核苷酸。这种核酸内切酶具有极高水平的比活性,且不存在任何可检出水平的蛋白水解活性。
某些生产模板会需要高于生理水平(200mM NaCl)的盐浓度。Benzonase®耐高盐核酸内切酶适合在200mM至1000mM NaCl的高盐浓度下,用于腺相关病毒载体生产中游的裂解和DNA消化步骤。该Benzonase®系列新品经测试可兼容多种去垢剂,包括作为TRITON™ X-100替代品的Deviron®去垢剂。
生物工艺应用
Benzonase®核酸内切酶非常适合严格的生物工艺应用。其降解的核酸片段大小远低于世界卫生组织 (WHO) 和美国食品和药物管理局 (FDA) 要求的 200 bp,此结果依照 GMP IPE-PQG 条件发布,并拥有 FDA 药物主档案(可在监管档案中引用)。
它可有效胜任各种工作条件和应用,包括:
- 病毒疫苗和病毒载体疫苗纯化
- 细胞和基因治疗制剂纯化
- 溶瘤病毒纯化
- 蛋白质和其他生物制品中的 DNA 和 RNA 去除
- 宿主细胞 DNA 去除
Benzonase®核酸内切酶有IPEG、PQG、GMP三个版本,可满足不同的生产要求。均为Emprove®计划覆盖产品,有助于准备监管送审文档(表1)。
Benzonase®核酸内切酶通过大肠杆菌W3110表达系统制备,病毒污染风险极小。
- Benzonase® 核酸内切酶,Emprove® Expert
- Benzonase® 核酸内切酶 Safety Plus Emprove® Expert 在化学成分明确的培养基中生产,每批均经过测试,确保不含外来病毒和支原体。
- Benzonase®耐高盐核酸内切酶也在化学成分确定培养基中生产,每批均经过支原体测试,并可应要求进行外源病毒测试。
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研究应用
Benzonase® 核酸内切酶可用于多种研究应用,包括:
- 从微生物组样本中去除宿主 DNA
- 改善微生物组研究中的微生物分类群鉴定
- 在疫苗研究过程中防止结块
- 在重组蛋白提取工作流程中降低裂解液粘度,从而提高目标蛋白产量
有多种高纯度、高浓度 Benzonase® 核酸内切酶可供选择。
Benzonase®核酸内切酶还可与蛋白质提取试剂组合提供,以进一步简化工作流程。
- BugBuster® 预混液:BugBuster® 蛋白质提取试剂,包含 Benzonase® 核酸内切酶和 rLysozyme 溶液
- BugBuster® HT 蛋白提取试剂:BugBuster 蛋白质提取试剂和 Benzonase® 核酸内切酶
- CelLytic™ B Plus试剂盒:溶菌酶、Benzonase®核酸内切酶和蛋白酶抑制剂
技术信息 |
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