微生物学培养基灌装试验

培养基灌装试验步骤

设计合理的培养基灌装试验应保证代表生产过程中的所有无菌操作。这些操作包括产品容器的准备和组装、产品容器到灌装区的转移，以及从灭菌过滤到产品放行的所有下游步骤，包括成品容器包装。

灌装后，含培养基的容器应进行微生物生长培养。适当培养后，污染容器预期会观察到微生物生长迹象。在关键生产区域，在进行培养基灌装试验的同时还要进行表面和空气监测。

培养基灌装试验培养基

培养基灌装试验的培养基应支持各类微生物，包括好氧细菌、酵母和霉菌（非选择性培养基）。大豆酪蛋白消化物培养基(SCDM)，又称为胰酪大豆胨液体培养基(TSB)，具有低选择性、促生长性、高溶解性和培养基澄清度等特性，使之成为制药培养基灌装试验最常用的培养基。

选择培养基时，须进行促生长能力试验以确保培养基支持微生物生长。这是培养基灌装必要的控制试验——只有证明培养基能够支持微生物生长，“无微生物生长”试验结果才有效。待检生物体请见药典规定。

无菌饮料灌装线的无菌检验最常用的是LG培养基(LGM)，包含支持微生物（如酵母、霉菌、细菌）生长的敏感、营养丰富肉汤。其pH可适当调节，以与生产线灌装饮料pH相匹配。LG培养基颜色澄清、淡黄，培养后可轻松检测微生物污染引起的混浊。

培养基灌装试验培养条件

培养温度应适合微生物负荷和环境分离菌的回收。为确保监管合规，灌装容器应经过两种温度条件培养：首先20–25°C培养7天，然后30–35°C培养7天。通过这种两步工艺，可在培养平皿被细菌占据前，为真菌生长提供机会。

培养基灌装试验频率

药品生产一般每条生产线每班次每年进行两次模拟试验，饮料行业每年一次试验。新生产之前应分三天连续进行三次灌装试验验证无菌工艺。另外，每当对无菌工艺进行重大变动（如人员、原料或设备变动）以及出现无法维持产品无菌性的迹象时，都要进行模拟灌装试验。

培养基灌装试验的一个前提是，其他所有能影响产品无菌性的因素，如容器和密封件的无菌性以及设备和过滤阶段的效率，均符合要求并分别经过验证。培养基灌装试验结果揭示了正常灌装工艺中发生产线污染的概率。