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Merck
CN
主页高级基因编辑X-tremeGENE™转染试剂比较指南

X-tremeGENE™转染试剂比较指南

X-tremeGENETM HP、X-tremeGENETM 9和X-tremeGENETM 360转染试剂

成功进行细胞转染的能力取决于细胞类型、实验方案和转染试剂的组成。X-tremeGENE™旨在用于将一系列分子（包括DNA、小RNA和CRISPR/Cas9组分）有效转染进入常见和难转染的细胞。

新产品：X-tremeGENE™ 360转染试剂是一种高效、多功能且可靠的解决方案，用于将siRNA/miRNA、质粒DNA和CRISPR/Cas9材料递送至难转染和常见的细胞类型中。如需更多信息，请访问sigmaaldrich.com/xtg360ro。

 X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂 X-tremeGENE™ 9 DNA转染试剂 X-tremeGENE™ 360转染试剂
DNA转染✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
siRNA/miRNA和CRISPR/Cas9组分转染NRNR✓ ✓ ✓
有效转染标准细胞系（如COS-7、HEK-293、HeLa、NIH 3T3和CHO-K1）✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
有效转染”难转染“细胞（如HT 29、HCT 116和K-562细胞）✓ ✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓
原代细胞转染✓ ✓NR✓ ✓ ✓
试剂的温和性✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
易用性（最小的优化）✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
转染后细胞毒性极低低极低
NR：不推荐
关注应用X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂X-tremeGENE™ 9 DNA转染试剂X-tremeGENE™ 360转染试剂X-tremeGENE™ siRNA转染试剂
细胞过程的功能研究✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
定量蛋白表达✓ ✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓—
基于siRNA的基因敲减研究—
—
✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
X-tremeGENE™ HP试剂可高效转染人原代成纤维细胞

图 1.X-tremeGENE™ HP试剂可高效转染人原代成纤维细胞。

原代成纤维细胞分离自人包皮，在6孔细胞培养板中使用4 μL X-tremeGENE™ HP试剂和1 μg编码了GFP的质粒DNA进行转染。转染后48小时观察GFP的表达。左图显示的是GFP荧光，右图显示的是相应的明场图像。

在人间充质干细胞的转染中，X-tremeGENE™ HP和9试剂的效果优于竞品试剂

图 2.在人间充质干细胞的转染中，X-tremeGENE™ HP和X-tremeGENE™ 9试剂的效果优于竞品试剂。

人间充质干细胞分离自四个不同供体的骨髓吸出物。按照指定的比例（试剂μL数：编码了GFP质粒DNA μg数），使用X-tremeGENE™ HP试剂（XHP）、X-tremeGENE™ 9试剂（X9）和竞品试剂（LTX）进行细胞转染。X-tremeGENE™ 9试剂未进行2:1比例测试）。未转染细胞作为对照（阴性）。转染后48小时进行FACS分析。

在难转染细胞类型中，X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂的效果优于竞品试剂。

图 3.在难转染细胞类型中，X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂的效果优于竞品试剂。

在A549细胞中X-tremeGENETM 360的效果优于Lipofectamine®试剂。

图 4.在A549细胞中，X-tremeGENETM 360的效果优于Lipofectamine试剂。使用X-tremeGENETM 360、Lipofectamine® 2000（Thermo Fisher Scientific）或Lipofectamine® 3000（Thermo Fisher Scientific），分别按照指定的试剂/DNA比例将编码了荧光素酶的质粒DNA转染进入A549细胞。 采用一种常规的荧光素酶活性测定方法对转染效率进行评估。通过对受损细胞胞浆中稀释的LDH进行定量，并与单独细胞进行对比来对细胞毒性进行评估。与采用Lipofectamine® 2000或Lipofectamine® 3000转染的细胞相比，采用X-tremeGENETM 360按最佳比例进行转染的细胞表现出了更高的转基因表达和更低的细胞毒性。

按照指定的比例（试剂μL数：编码了GFP质粒DNA μg数），使用X-tremeGENE™ HP试剂（XHP）和竞品试剂（LTX和L2K）进行细胞转染。通过使用显微镜观察GFP荧光而对转染效率进行可视化评估。

针对不同细胞类型的产品推荐

成熟细胞系X-tremeGENE™ HP DNA转染试剂X-tremeGENE™ 9 DNA转染试剂X-tremeGENE™ 360转染试剂
CHO-K1✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
COS-7✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓
NIH-3T3✓✓ ✓✓ ✓ ✓
HeLa✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
HEK-293✓ ✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓
Hep-G2✓✓ ✓✓ ✓ ✓
HT1080✓ ✓✓ ✓ ✓✓ ✓
HT29✓NR✓ ✓
PC-3✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓
K-562✓ ✓ ✓NR✓ ✓ ✓
U-2 OS✓NR✓
MCF-7✓✓ ✓ ✓✓ ✓ ✓
RAW✓NR✓ ✓
HCT 116✓ ✓ ✓✓ ✓✓ ✓ ✓
Jurkat✓NR✓
PC-12✓ ✓✓ ✓✓ ✓
原代细胞
人原代成纤维细胞✓ ✓NR✓ ✓
MEF✓ ✓NR✓ ✓
干细胞
人间充质干细胞✓ ✓NR✓ ✓
小鼠胚胎干细胞（E14TG2a）✓ ✓✓ ✓✓ ✓
昆虫细胞系
High Five✓ ✓NR✓ ✓
SF9✓ ✓NR✓ ✓
NR：不推荐

注意：以上数据是使用编码了GFP的pcDNA3.1质粒或编码了荧光素酶的pCI质粒生成的，二者均带有巨细胞病毒（CMV）启动子。这些推荐是基于实验结果而作出的指导。必须通过经验来确定理想的试剂/DNA比例。

应用表格

关注应用推荐产品优点
  • 癌症研究
    常见癌症研究
    细胞系的转染，用于功能性细胞分析，包括
    基因调控和蛋白质互作研究
    以及通路分析。

  • 靶标评估
    常见细胞系的转染，用于靶标
    评估。
  • 低细胞毒性
  • 充分降低试剂引起的脱靶效应
  • 简单方法
  • 针对不同细胞系的广泛适用性
  • 低细胞密度下的高转染效率
  • 在最高100%血清中保持活性
  • 难转染和原代细胞
    原代细胞和”难转染“
    细胞系的的转染，用于功能性细胞分析。

  • 蛋白质表达
    转染用于分析或定量
    蛋白质表达。
  • 高水平的蛋白质表达
  • 简单方法
  • 快速实验方案
  • 高转染效率
  • 在含血清的培养基中保持活性
  • 合成的；不含人源或动物来源成分
  • 使用siRNA转染进行基因敲减
  • 低细胞毒性
  • 高敲减效率
  • 针对不同细胞系的广泛适用性
  • 在含血清的培养基中保持活性
X-tremeGENE™为罗氏公司商标。仅用于生命科学研究。不可用于诊断流程。

效率和优化

了解试剂选择、DNA/RNA与转染试剂的比例以及实验方案/方法等优化如何成为影响转染效率的关键决定因素。

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