分子克隆与蛋白质表达

分子克隆的目标是将目标基因(GOI)插入质粒载体中,质粒载体是一种环状DNA,其中包含各种有助于克隆、克隆筛选和蛋白质表达的元件。 研究人员通常使用DNA限制性内切酶和连接酶,将目标基因以同义方式插入表达载体中,以便后续进行蛋白质表达。随后,该载体被转入细胞内,由细胞表达目标基因编码的蛋白质;或者利用无细胞蛋白质合成系统实现蛋白质表达。
一旦蛋白质表达成功,即可研究其功能,例如其对细胞信号传导、形态或其他细胞内方面的影响。此外,该蛋白质也可大量表达、纯化,并应用于众多下游研究。如需了解更多信息,请探索我们为昆虫、细菌和哺乳动物蛋白质表达系统提供的克隆与表达工作流程中全面可靠的试剂和资源。
Products
RNA 和 DNA 修饰酶
在分子克隆过程中,研究人员常使用限制性内切酶切割DNA,并使用RNA和DNA修饰酶等其他酶来添加、去除或改变核酸上的化学基团。为满足多样化的研究需求,我们提供种类齐全的此类关键酶,包括碱性磷酸酶、蛋白酶、T7 RNA聚合酶、焦磷酸酶、核糖核酸酶A以及T4 DNA连接酶。 我们的试剂配合特制缓冲液使用,可确保DNA和RNA操作的高效性和可靠性。
Novagen® pET系统、Simplicon®载体及UCOE®蛋白质表达系统
我们的大肠杆菌、昆虫和哺乳动物表达载体简化了阳性转化子的筛选。部分重点产品包括:
- Novagen® pET 系统被公认为细菌系统中克隆和表达重组蛋白的黄金标准。
- Simplicon® 体内蛋白质表达系统提供了一种非基因组整合、可调且基于合成自复制 RNA 的表达系统。Simplicon® 表达技术可在转染的人细胞中立即实现多基因的高水平持续蛋白质表达,且不存在基因组整合的风险。
- UCOE®(普遍染色质开放元件)表达载体技术可在稳定转染的哺乳动物细胞中,于 30 天内实现克级蛋白产量。UCOE® 表达技术可防止转基因沉默,并能提供比传统载体更一致、更稳定且更高水平(最高可达 20 倍)的基因表达,且不受染色体整合位点的影响。
细菌和酵母转化试剂
细菌转化是指利用热休克和电穿孔等方法将外源DNA插入细菌的过程。我们的感受态细胞产品组合经过专门设计,即使在苛刻的实验条件下也能实现最佳的质粒和蛋白质表达。主要亮点包括:
- NovaBlue® 感受态细胞在效率和质粒保存方面经过优化,可支持优质的文库构建和质粒稳定性。
- Rosetta™、Origami™ 和 Overnight Express™ 系统可促进蛋白质的正确折叠,并提高细胞毒性蛋白的溶解度或表达水平。
针对酵母转化,我们提供简便的操作方案和可扩展的产品,可无缝集成到蛋白质表达工作流程中。
针对哺乳动物细胞研究,请访问我们的转染页面查看更多选项。
来自 BCCM/GeneCorner 的质粒载体
探索我们来自 BCCM/GeneCorner 的扩展质粒载体产品线——这是一个独特的、通过 ISO 认证的质粒库,由根特大学 (UGent) 理学院生物医学分子生物学系托管。这一多样化的收藏包括针对多种宿主生物的各种克隆和重组蛋白表达质粒,支持分子和蛋白质生物学领域的现代化研究。
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相关资源
- Brochure: Molecular Essentials Guide
Learn how our comprehensive molecular tools and reagents provide precise, ready-to-use solutions for your workflows.
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
无细胞蛋白合成或表达 (CFPE) 是一种合成生物学方法,无需细胞参与即可在溶液中快速生产重组蛋白质。研究人员可使用从一系列不同类型细胞中提取的生物分子翻译机器,在一天内表达目标蛋白质。
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
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