蛋白质浓缩和缓冲液置换

蛋白质浓缩

现有多种蛋白质浓缩方法，包括多孔滤膜过滤、高渗溶液透析和沉淀/盐析。超滤法相对便捷，在压力或离心力作用下借助半透膜浓缩蛋白，蛋白质变性、失活和降解程度极低。利用此技术，可让过量液体流经滤膜，截留下较大的蛋白质分子，通过缩减样品体积提高蛋白浓度。 

蛋白质富集

所谓蛋白质富集，指浓缩生物样品中特定种类或亚型的蛋白质以便进一步分析。蛋白质富集法用于分离低丰度蛋白，可降低样品复杂程度。为改善下游蛋白质组学分析，富集过程会分离并浓缩靶标蛋白质。蛋白质富集过程常基于蛋白质分子量差异，利用超滤法分离蛋白质。

缓冲液置换和脱盐

纯化的蛋白质往往需要转移到合适的缓冲液中才可进一步分析。缓冲液置换、脱盐和去垢剂去除可采用以下方法：

• 透析：基于透膜能力去除渗透性小分子，如盐、去垢剂、溶剂和其他杂质。
• 柱层析：利用体积排阻法凝胶过滤柱去除盐分。
• 渗滤：在压力或离心力作用下，基于分子大小，借助多孔超滤膜去除盐、去垢剂和其他杂质。