抗原封闭实验方案
推荐按照下方描述的标准封闭实验方案使用Prestige Antigens™以及相应的Prestige Antibodies。
溶于Pre-Adsorption的Prestige Antigens™用于IHC或ICC实验
对抗体重新滴定以确定用于封闭研究的最佳稀释比。最佳的滴定是指抗体仍能显示预期染色的最高稀释比。
根据抗体（150,000 Da）和Prestige Antigen（15,000 Da）的浓度和分子量计算Prestige Antigen的10X和100X摩尔过量。
将计算得到的相应抗体量和Prestige Antigen在2 mL管中混合并用PBS将总体积调整至30-50 μL。
将含有抗体/Prestige Antigen的离心管室温孵育30分钟，或在4 °C下轻轻摇动过夜。
使用不加Prestige Antigen的一抗或另一种不同的Prestige Antigen（不对应于靶标蛋白）作为对照。
以最高速（15,000 rpm）将含有抗体/Prestige Antigen的离心管离心15分钟以沉淀任何免疫复合物。
将上清小心移液至一支新的离心管以制备用于免疫染色的工作溶液。由于抗体现在已经稀释了4-12倍，必须相应对抗体稀释液的体积进行调整。
按照常规IHC或ICC实验方案继续您的实验。
溶于Pre-Adsorption的Prestige Antigens™用于WB实验
在室温下用溶于3.5 mL封闭缓冲液的相应Prestige Antigen（100X摩尔过量）将按1:250稀释的一抗预孵育30分钟。100X摩尔过量的Prestige Antigen是基于抗体（150,000 Da）和PrEST Antigen（15,000 Da）的浓度和分子量而计算得到的。
作为Western blot的对照，可加入一组不加Prestige Antigen或使用另一种不对应于靶标蛋白的不同Prestige Antigen的一抗反应。
将孵育的抗体-Prestige Antigen混合物加入至封闭的膜上并在旋转混合仪或翘板摇床上室温孵育1小时。
按照常规Western blottting实验方案继续Western blot实验。
2017年十月修改
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