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主页3D细胞培养明胶包被实验方案

用于细胞培养的明胶包被实验方案

明胶是胶原蛋白的一种分子衍生物,通过对来自牛皮的胶原蛋白进行碱性消化而合成。明胶是一种水状胶体,富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸,具有结构稳定性。明胶可为细胞培养提供理想的细胞附着基质。最适浓度取决于细胞类型和研究对象。

明胶包被前重要注意事项

  • 确保细胞健康且数量充裕。
  • 明胶溶液需要在包被前在37°C下完全液化。
  • 明胶溶液可4-8°C无限期保存;高温会导致水解和完整性损失。
  • 常用表面覆盖浓度为100 – 200 µg/cm2。表面覆盖浓度可能因培养细胞而异。必须确定每种细胞系和应用的最佳附着条件。
  • 包被之后切勿过度干燥,否则会破坏明胶结构并影响细胞附着。

用于细胞培养的明胶包被实验方案

  1. 将明胶溶解在组织培养级水中,制备2%(w / v)溶液。
  2. 在121°C、15 psi下高压灭菌30分钟。
  3. 5-10 µL明胶溶液/cm2100-200 µg/cm2)包被培养表面。
  4. 在加入细胞或培养基之前至少干燥2小时。
  5. 或者,也可使用明胶溶液(货号G1393)直接包被培养皿。
表1.细胞附着明胶

明胶包被培养皿常见问题

  • 明胶产品的纯度是多少?
    我们无法确定纤连蛋白溶液的纯度。我们所有的纤连蛋白粉末纯度均为70-90%。

  • 稀释明胶粉的最佳溶剂是哪种?
    表1中提供了适于稀释明胶的溶剂。

  • 明胶可以储存多长时间?
    明胶溶液可在2-8°C下无限期保存。如果将明胶包被板密封良好,可防止明胶污染和/或过度干燥,则最多可在2-8°C下保存4周。如果包被材料表面变色或出现裂纹,请勿使用产品。

  • 明胶的 Bloom数有何意义?
    Bloom数由 Oscar T. Bloom 提出,代表明胶膜强度。首先使用强度测定计通过受控过程测量明胶膜强度。数字越高,产品强度越大。 Bloom 数/ Bloom 强度有助于选择适合您应用的明胶产品。

 

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