免疫检测试剂和底物

在 Western 印迹技术中,决定实验成败的最重要因素是所用试剂的质量。我们提供一系列预优化的 Western 印迹试剂,它们能协同工作,提供强特异性信号和低背景,帮助您快速获得发表级的结果。
Products
用于西部印迹的化学发光底物
Immobilon®
- Immobilon®Classico、Crescendo 和 Forte 化学发光底物
- Immobilon® Classico: ~ 6 pg target protein
- Immobilon® Crescendo: ~ 1-3 pg target protein
- Immobilon® Forte: ~400 fg 目标蛋白
- Immobilon®Western HRP、Immobilon® ECL Ultra 和 Immobilon® UltraPlus Western 底物在标准的双组分格式中具有极高的灵敏度和较长的信号寿命。这些配方允许使用更稀释的一抗溶液进行免疫印迹检测。检测限:
- Immobilon® Western HRP 底物:~ 400 fg 目标蛋白质
- Immobilon® ECL Ultra 底物:低飞摩克范围
- Immobilon® ECL UltraPlus Western Blot HRP 底物:低飞克范围
Immobilon®化学发光 HRP 底物的相对灵敏度

图 1.以 4 μg 蛋白为起点,将 A431 细胞裂解液 [12-110] 的两倍稀释系列在 10%mPAGE®凝胶 [MP10W15] 上以 200V 电压在 MOPS 缓冲液 [MPM0PS] 中运行 25 分钟。蛋白在含 10%乙醇的 mPAGE® 转印缓冲液 [MPTRB] 中转印至 Immobilon®-P 膜 [IPVH00010] 1 小时。用兔抗 HH3 [H0164] 和山羊抗兔[AP132P] 抗体按所列稀释度对 HH3 蛋白(15 kDa)进行免疫检测。在 Bio-Rad® ChemiDoc 系统上用指定的 ECL 试剂孵育印迹 5 分钟,曝光 30 秒后拍摄图像。
Cytiva™ Amersham™ ECL检测试剂使用基于增强型发光酚的HRP检测,有不同的配方可供选择,以满足不同的Western印迹应用需求。
- Cytiva Amersham™ ECL Western 印迹检测试剂推荐用于确证性 Western 印迹应用。
- Cytiva Amersham™ ECL Prime Western 印迹检测试剂可在同一张印迹上检测高丰度和低丰度蛋白质。
- Cytiva Amersham™ ECL Select Western 印迹检测试剂即使使用稀释的一抗和二抗也能提供高灵敏度。
- Cytiva Amersham™ ECL Start Western 印迹检测试剂专为化学发光检测中高表达蛋白而开发。
用于 Western 印迹的致色底物
致色检测利用过氧化物酶(如:HRP)或碱性磷酸酶(AP)共轭酶催化反应,沉淀出不溶性的有色沉淀进行检测、我们用于 Western 印迹的致色底物有溶液、粉末和片剂三种形式,为储存和使用提供了灵活的选择。
- SIGMAFAST™ DAB 片剂(显色性 HRP 底物由比色沉淀底物组成,与辣根过氧化物酶反应后产生棕色,可溶解于水,制备成即用型缓冲溶液,用于印迹检测。
- BCIP/NBT (蓝/紫)和 BCIP/TNBT (蓝/棕)单试剂(显色 AP 底物)是高灵敏度的碱性磷酸酶比色底物。
- TMB增强型单组分HRP膜底物(显色性HRP底物)是一种单组分比色底物,可产生深蓝色产物。
信号增强剂
- Immobilon® 信号增强剂 设计用于观察到低信号强度时的 Western 印迹应用。 信号增强剂 设计用于观察到低信号强度时的 Western 印迹应用。增强抗体-抗原反应可使信号强度增加 2 到 10 倍。Immobilon® 信号增强剂与 PVDF 和硝酸纤维素膜兼容,可用于显色、化学发光和荧光检测方法。
- SignalBoost™ Immunoreaction Enhancer Kit is designed to enhance chemiluminescent or colorimetric target signal on nitrocellulose or PVDF membranes
相关资源
- Handbook: Protein Blotting Tips and Tricks
This handbook represents the collective experience of our application scientists, who are actively engaged in advancing the science of protein blotting and detection.
- Brochure: Rethink Western Blotting
Explore our products designed to improve each step of the Western blotting workflow.
- Article: Western Blotting Protocol (Immunoblotting Protocol)
Western blot protocol with workflow steps for different blot procedures, describing the electrophoretic transfer of proteins from SDS polyacrylamide gels to sheets of nitrocellulose.