二抗

蛋白质A、G和L

来自 金黄色葡萄球菌的蛋白A。来自 链球菌属 的蛋白G。两者都有与哺乳动物IgG的Fc部分相结合的结合位点。这些蛋白质对IgG的亲和力因动物种类而异。蛋白G对大鼠、山羊、绵羊和牛的IgG以及小鼠的IgG1和人的IgG3具有较高的亲和力。蛋白A对猫和豚鼠的IgG具有较高的亲和力(表1)。除了可与IgG的Fc结合位点相结合外，天然蛋白G还可与白蛋白、Igs的Fab区以及细胞膜的结合区相结合，这些可能会导致非特异性染色的发生。我们已通过创造蛋白质重组形式的方式解决了这些问题。重组蛋白G已设计消除了白蛋白结合区，而重组蛋白G′是一种截短的蛋白质，它缺乏对白蛋白、Fab和细胞膜的结合位点，而保留了对Fc的结合位点，因此与其天然形式相比，其对IgG更具特异性。

蛋白L，来自 大消化链球菌，对来自不同物种的kappa轻链具有亲和力(表 2) 。它可以检测含有kappa轻链的单克隆或多克隆IgG、IgA和IgM以及Fab、F(ab′)2和重组单链Fv(scFv)片段。它也能结合鸡的IgG。注意：像牛、山羊、绵羊和马这样的物种，其Igs几乎只含有lambda链，如果真是这样，它们就不能很好地与蛋白质L结合。

检测试剂

蛋白A和G常用作一种通用的、非物种特异性的试剂，来与哺乳动物组织中的一级抗体或表面IgG相结合。蛋白质G推荐可用于包括小鼠和大鼠在内的大多数物种。蛋白A推荐可用于猫和豚鼠。两者均不建议用于对IgA或IgM、Fab片段或禽类的IgG的检测。当与琼脂糖等树脂结合时，蛋白A和蛋白G或可用于血清或腹水中免疫球蛋白的亲和纯化。

蛋白L常用作一种结合哺乳动物或鸟类的一级抗体或所有物种的表面Igs的通用试剂。它特别适用于对Fab、F(ab′)₂ 片段和重组scFv片段，以及对与Fc受体结合的Igs，或对在牛Igs存在下的单克隆抗体的检测。其使用仅限于检测带有kappa轻链的Igs。

树脂

蛋白A和蛋白G具有对哺乳动物的IgG的Fc部分的结合位点。这些蛋白质对IgG的结合能力因物种而异。一般来说，IgG对蛋白G的亲和力高于蛋白A，且蛋白G可以结合来自更广泛物种的IgG。各种不同的IgG亚类，尤其来源于小鼠和人的，其对蛋白A的亲和力变化差异大于蛋白G。因此，蛋白A可用于从某些物种中制备同型的纯IgG。蛋白L适合于从无牛的IgG污染的细胞培养上清液中分离小鼠单克隆抗体。