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生物来源
bovine pancreas
质量水平
无菌性
aseptically filled
表单
essentially salt-free, lyophilized powder
比活
≥10,000 BAEE units/mg protein
分子量
23.8 kDa
组成
protein, ≥95%
溶解性
hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
异质活性
Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
储存温度
−20°C
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一般描述
胰蛋白酶分子有两个结构域:一个与酶活性位点和色氨酸残基有关;另一个与8-苯胺基萘-1-磺酸盐结合有关。
应用
对于胰蛋白酶消化肽,胰蛋白酶:肽 使用约为 1:100 至 1:20 的比例。从培养表面除去粘附细胞是本产品的一个典型应用。 从其底物中去除细胞所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物的年龄。 胰蛋白酶也被用于细胞培养期间细胞的再悬浮、蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶内消化。 其他应用包括:通过基于膜的技术评估结晶,用在确定动力学陷阱的存在会限制蛋白质的折叠速率和产量的一项研究中。
胰蛋白酶可使贴壁细胞从组织培养板上脱落,以用于传代。胰蛋白酶用于研究评估大分子群集对人α-乳清蛋白结构稳定性的影响。 胰蛋白酶也用于研究哈茨木霉分泌组的BN-PAGE分析。
生化/生理作用
胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中,用于中和钙离子和镁离子,这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等,将抑制胰蛋白酶。
丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等,将抑制胰蛋白酶。
单位定义
使用 BAEE 作为底物,一个 BAEE 单元,将在 pH 7.6,25℃ 下,每分钟产生 0.001 的 A253。
在25℃、pH 7.6条件下,使用BAEE作为底物,一单位BAEE每分钟可产生0.001的ΔA253 。反应体积= 3.2 ml(1 cm光程)。
制备说明
TPCK处理
分析说明
E1%/280法测定蛋白
其他说明
查看更多关于 胰蛋白酶的信息, 请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer
底物
抑制剂
产品编号
说明
价格
警示用语:
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
储存分类代码
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
个人防护装备
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
法规信息
动植物源性产品
历史批次信息供参考:
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
Hang Lin et al.
Journal of separation science, 42(11), 1980-1989 (2019-04-05)
A novel strategy was successfully developed for screening trypsin inhibitors in traditional Chinese medicines based on monolithic capillary immobilized enzyme reactors combined with liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Organic polymer based monolithic enzyme reactors were firstly prepared by covalently bonding trypsin
De-Lin Zhang et al.
Acta biochimica et biophysica Sinica, 44(8), 703-711 (2012-06-28)
The folding of protein, an important process for protein to fulfill normal functions, takes place in crowded physiological environments. α-Lactalbumin, as a model system for protein-folding studies, has been used extensively because it can form stable molten globule states under
John C Tran et al.
Analytical chemistry, 80(5), 1568-1573 (2008-01-31)
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Proteomics, 12(17), 2729-2738 (2012-06-30)
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实验方案
本方案适用于使用Nα-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯(BAEE)作为底物测定胰蛋白酶活性。本方案是基于连续分光光度速率测定(A253,光程= 1cm)方案:
Continuous spectrophotometric rate determination method using BAEE substrate measures trypsin activity, essential for enzyme characterization.
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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