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一般描述
胰蛋白酶由223个氨基酸残基的单链多肽组成，其通过从胰蛋白酶原去除N-末端六肽而产生（在Lys-Ile肽键处被切割）。氨基酸序列通过6个二硫键交联。这是胰蛋白酶、β-胰蛋白酶的天然形式。β-胰蛋白酶可以在Lys-Ser残基处发生自裂解，并产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
应用
该产品的典型用途是从培养表面除去粘附细胞。从其基底上分离所需的胰蛋白酶浓度主要依赖于细胞类型和培养基已使用的时间。
生化/生理作用
胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。胰蛋白酶活性的最佳 pH 条件为7-9。胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。将 乙二胺四乙酸（EDTA） 添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。去除这些离子会增加酶活性。
特点和优势
StableCell™胰蛋白酶是一种用于细胞解离的温和型溶液。当储存在2-8°C时可维持酶活不变，而我们的研究表面当保留在室温下最长达7周后，酶活依然可以保留>90%！
- 节省时间 - 无需反复冻融
- 节省空间 - 储存在2-8°C，节省冷冻空间
- 无需分装
- 最适合于您的细胞 - 在GMP环境下生产
制备说明
采用过高的胰蛋白酶浓度孵育细胞较长时间会对细胞膜造成损伤并杀死细胞。将胰蛋白酶溶解或将其从浓缩液进行稀释应采用不含有Ca2+或Mg2+的缓冲盐溶液。
储存及稳定性
推荐在到货后保存在2-8°C。在稳定性研究中，数据表明当储存在37°C时，该产品可保留≥90%的活性最长8周。
法律信息
StableCell is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
动植物源性产品
Multiplexed isobaric tagging protocols for quantitative mass spectrometry approaches to auditory research.
Vetter D E, et al.
Methods in Molecular Biology, 493, 345-366 (2009)
Methods of Enzymatic Analysis (1965)
Ryan Calcutt et al.
Science advances, 7(43), eabj1469-eabj1469 (2021-10-21)
[Figure: see text].
商品
Use of MULTI-seq lipid-modified oligos, protocol, and troubleshooting guide for PCR Assays and Sequencing applications.
实验方案
StableCell™ Trypsin solutions are designed to perform cell detachment as standard trypsin solutions do, without the need to aliquot, freeze, and thaw. This saves significant time before passaging.
StableCell™胰蛋白酶溶液设计用于执行标准胰蛋白酶溶液所实现的细胞解离，但不同的是前者无需等分、冷冻和解冻。这样可以节省大量时间。
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