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重组
expressed in E. coli
质量水平
检测方案
≥80% (SDS-PAGE)
形式
solution
比活
≥1 units/mg protein
分子量
25 kDa
浓度
0.02-0.06 mg/mL
UniProt登记号
运输
wet ice
储存温度
−20°C
基因信息
human ... DHFR(1719)
一般描述
人DHFR是一种含有186个氨基酸的蛋白质，具有25kDa的表观分子量。它与 大肠杆菌 蛋白质具有30%的同源性，与脊椎动物蛋白质的同源性高达70％。
应用
人二氢叶酸还原酶已被用于研究绿色荧光蛋白的稳定表达和硫氧还蛋白过氧化物酶-1基因在牛肝菌中的定向破坏。 人二氢叶酸还原酶还被用于研究人二氢叶酸还原酶作为二元复合物的结构分析中。
人二氢叶酸还原酶已被用于：
- 研究绿色荧光蛋白的稳定表达和硫氧还蛋白过氧化物酶-1基因在牛肝菌中的定向破坏
- 研究人二氢叶酸还原酶作为二元复合物的结构分析
- 研究其在酶抑制研究中的体外动力学检测
生化/生理作用
Km5,6
NADPH 0.16 mM
7,8-二氢叶酸 0.03 mM
8-甲基蝶呤 0.13 mM
Ki7
叶酸 2.6x10-5 mM
甲氨蝶呤 6.1-9x10-9
NADPH 0.16 mM
7,8-二氢叶酸 0.03 mM
8-甲基蝶呤 0.13 mM
Ki7
叶酸 2.6x10-5 mM
甲氨蝶呤 6.1-9x10-9
二氢叶酸还原酶（DHFR）是胸苷合成中的一种关键酶。它催化二氢叶酸（DHF）还原为四氢叶酸（THF）。它以较低的速度催化叶酸转化为THF。由于胸苷是DNA合成必需的底物，因此DHFR是抗癌药物开发的靶点。甲氨蝶呤是二氢叶酸还原酶抑制剂原型。来自Sigma的酶已被用于杜氏利什曼原虫蝶啶还原酶1（PTR1）的抑制研究。该酶已被用作阳性对照，用于测定从耻垢分枝杆菌中纯化的MS0308蛋白的DHFR活性。
人 DHFR 基因，以及其他哺乳动物的 DHFR 基因，通过基因扩增或氨基酸突变机制克服了甲氨蝶呤的抑制作用。二氢叶酸还原酶（DHFR）可催化NADPH依赖性的二氢叶酸（DHF）还原为四氢叶酸（THF），并以更低的速率将叶酸转化为THF。反应产物THF是通过胸苷酸合成酶将脱氧尿苷酸（dUMP）转化为脱氧胸苷酸（dTMP）过程中的重要辅助因子。它是胸苷合成中的关键酶。 因此，DHFR是DNA合成中的关键酶，并已成为药物开发和癌症治疗的靶标。不同来源的DHFR之间的差异使得研究人员能够开发出种类多样的DHFR抑制剂，例如甲氧苄氨嘧啶（抗菌和抗真菌剂）、乙胺嘧啶（抗原生动物）和甲氨蝶呤； MTX（抗肿瘤药、抗牛皮癣药和抗炎药）。
单位定义
在pH 7.5，22°C条件下，一个单元可在1分钟内将1.0μmol二氢叶酸转化为四氢叶酸。
外形
溶于含有10 mM Tris（pH 8）、1 mM EDTA、0.5 mM DTT、5μM NADPH、蛋白酶抑制剂和50％甘油中的溶液中。
WGK
WGK 3
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)
法规信息
常规特殊物品
Eukaryotic dihydrofolate reductase.
R L Blakley
Advances in enzymology and related areas of molecular biology, 70, 23-102 (1995-01-01)
Disturbed biopterin and folate metabolism in the Qdpr-deficient mouse
Xu F, et al.
Febs Letters, 588, 3924-3931 (2014)
Dihydrofolate reductase: binding of substrates and inhibitors and catalytic mechanism.
J E Gready
Advances in pharmacology and chemotherapy, 17, 37-102 (1980-01-01)
Dimitrios Evangelopoulos et al.
The FEBS journal, 278(24), 4824-4832 (2011-10-07)
Mycobacterium tuberculosis, the most successful bacterial pathogen, causes tuberculosis, a disease that still causes more than 2 million deaths per year. Arylamine N-acetyltransferase is an enzyme that is conserved in most Mycobacterium spp. The nat gene belongs to an operon that
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Nature methods, 10(9), 896-902 (2013-08-06)
Protein function often depends on the exchange between conformational substates. Allosteric ligand binding or distal mutations can stabilize specific active-site conformations and consequently alter protein function. Observing alternative conformations at low levels of electron density, in addition to comparison of
商品
Biofiles reviews innovative technologies for cancer research, reflecting the complexity of the disease.
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本期生物档案回顾了我们的一些最新和最具创新性的技术及其在癌症研究中的具体应用。在准备本期生物档案时，有人指出癌症极为复杂，要确定一个与其他主题完全无关的主题极为困难。。
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