形式
liquid
质量水平
包装
vial of 50 μL
浓度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
应用
CRISPR
运输
dry ice
储存温度
−20°C
一般描述
通用CRISPRs阴性对照被设计为不能被人类，小鼠或大鼠基因组识别。单个载体形式包括Cas表达盒和gRNA序列。GFP通过2A肽段连接，与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达，实现了对转染效率的追踪，也能通过荧光激活细胞分选术（FACS）对细胞群落进行富集。
应用
Functional Genomics/Target Validation
- Creation of gene knockouts in cell lines
- Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes
特点和优势
无需特定的靶向CRISPR/Cas9 系统，即可表达Cas9和GFP。
组分
1 管包含1μg 表达非靶向向导序列的U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒。
原理
CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。
外形
Sigma U6-gRNA/CMV-Cas9-GFP 质粒表达非靶向的向导序列，以浓度 20ng/μl in 50μl的溶液形式提供。
制备说明
Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装，
可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议
在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。
可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议
在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。
其他说明
文献中使用的标准转染浓度范围为2~8μg的单个的表达向导RNA和Cas9的载体。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）
法律信息
CRISPR专利正在申请中
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
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商品
Validate CRISPR gene editing experiments easily with Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit, ensuring successful editing.
实验方案
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具，可让所有人掌握基因组编辑。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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