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Merck
CN

C2674

胶原酶 来源于溶组织梭菌

lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

别名:

梭菌肽酶 A

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关于此项目

化学文摘社编号:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.75
EC Number:
232-582-9
MDL number:
Specific activity:
≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
Biological source:
Clostridium histolyticum
Concentration:
1 mg/mL
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biological source

Clostridium histolyticum

Quality Segment

type

Type I-A

form

lyophilized powder

specific activity

≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

mol wt

68-130 kDa

concentration

1 mg/mL

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable

pH

6.3-8.8

shipped in

ambient

storage temp.

−20°C

General description

胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型,它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶,即胶原酶和梭菌蛋白酶。

Application

来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被用于以下应用:

  • 足细胞分离
  • 用于酶催化法的对比
  • 用于免疫细胞化学的组织制备
  • 睾丸精子提取
  • 制备单细胞悬浮液
  • 免疫荧光法

本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

适用于制备用于测序的单细胞悬液。

Biochem/physiol Actions

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物,分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

Preparation Note

该胶原酶来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶,分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液(含有50 mM TES,0.36 mM氯化钙,在37℃时pH 7.4)制备,浓度为1-2 mg/mL。

Other Notes

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。

Disclaimer

本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天,其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定,并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时,可保留100%活性。


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pictograms

Health hazardExclamation mark

signalword

Danger

Hazard Classifications

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

target_organs

Respiratory system

存储类别

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 1

flash_point_f

Not applicable

flash_point_c

Not applicable

ppe

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves



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