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安全信息

C2674

Sigma-Aldrich

胶原酶 来源于溶组织梭菌

lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

别名:

梭菌肽酶 A

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About This Item

CAS号:
9001-12-1
EC 号:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC 号:
232-582-9
MDL编号:
MFCD00130830
UNSPSC代码:
12352204
NACRES:
NA.75

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

200

类型

Type I-A

形式

lyophilized powder

比活

≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

浓度

1 mg/mL

技术

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

pH值（酸碱度）

6.3-8.8

运输

ambient

储存温度

−20°C

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相关类别

一般描述

胶原酶是一种蛋白酶，可切割三螺旋结构的蛋白，即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型，它们属于基质金属蛋白酶（MMP）家族。来自溶组织梭菌（ Clostridium histolyticum ）的胶原酶具有非常强的活性，它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶，即胶原酶和梭菌蛋白酶。

应用

来自溶组织梭菌（ Clostridium histolyticum ）的胶原酶被用于以下应用：

  • 足细胞分离
  • 用于酶催化法的对比
  • 用于免疫细胞化学的组织制备
  • 睾丸精子提取
  • 制备单细胞悬浮液
  • 免疫荧光法

本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织，以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于（浓度约为1mg/ml）对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。

适用于制备用于测序的单细胞悬液。

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物，分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。

注意

本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天，其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品（ 10 mg/mL）经快速冷冻可保持稳定，并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时，可保留100％活性。

单位定义

一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。

制备说明

该胶原酶来自溶组织梭菌（Clostridium histolyticum）的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶，分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液（含有50 mM TES，0.36 mM氯化钙，在37℃时pH 7.4）制备，浓度为1-2 mg/mL。

底物

产品编号
说明
价格

象形图

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

警示用语：

Danger

危险分类

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

靶器官

Respiratory system

WGK

WGK 1

闪点(°F)

Not applicable

闪点(°C)

Not applicable

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

法规信息

常规特殊物品

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实验方案

使用FALGPA（N-（3- [2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala）进行的胶原酶酶法检测（EC 3.4.24.3）

在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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