产品线
Duolink®
质量水平
技术
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
适用性
suitable for brightfield
suitable for fluorescence
运输
wet ice
储存温度
−20°C
应用
在标准免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）或免疫细胞化学（ICC）检测中测试您的一抗（IgG类，单克隆或多克隆），以确定最佳的固定、封闭和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定的细胞、离心涂片细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定或石蜡包埋（FFPE）的组织（新鲜或冷冻）。无最小细胞数量要求。
让我们为您完成相关工作，了解更多关于我们定制服务计划的相关信息，以加速您的Duolink®项目
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要执行完整的 Duolink ® PLA 原位 实验，您需要两种识别两个靶表位的初级抗体（PLA、IHC、ICC 或 IF 验证）。其他必要试剂包括一对不同物种的 PLA 探针（一个加号和一个减号）、检测试剂、清洗缓冲液和封固剂。使用标准免疫荧光分析设备进行分析。HRP 也可用于明场检测。
特异性
Duolink® In Situ Probemaker 通过允许您创建自己的 PLA 探针来满足特定的检测要求，从而进一步扩展了您的可能性。
使用 Duolink®原位 Probemaker 加号、减号探针，您只需将加号、减号寡核苷酸臂直接偶联到您的抗体上，即可快速方便地操作。除了提供独特的功能，这也意味着在执行 Duolink ® 原位检测时，您的一抗必须来自于哪个物种不再有任何限制。
应用说明
待偶联抗体的浓度必须为 1 mg/mL。不得使用大于 20 mL 的体积进行偶联。抗体必须在无胺缓冲液中，理想的 PBS。缓冲液应不含载体，但可能含有 0.1%BSA、5% 海藻糖和 0.02% 叠氮化钠。
在标准免疫荧光 (IF)、免疫组织化学 (IHC) 或免疫细胞化学 (IHC) 分析中测试您的初级抗体（IgG类、单克隆或多克隆），以确定最佳固定、阻断和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片器细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定的、石蜡包埋 (FFPE) 或组织（新鲜或冷冻）。没有要求最小数量的细胞。
让我们替您做这些工作，了解更多关于我们的客户服务计划的信息，以加速您的Duolink®项目
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特异性
Duolink® In Situ Probemaker 通过允许您创建自己的 PLA 探针来满足特定的检测要求，从而进一步扩展了您的可能性。
- 研究同源二聚体
- 研究来源于同一物种的两种一抗的蛋白质-蛋白质相互作用
- 研究与任何物种一抗的蛋白质-蛋白质相互作用
使用 Duolink®原位 Probemaker 加号、减号探针，您只需将加号、减号寡核苷酸臂直接偶联到您的抗体上，即可快速方便地操作。除了提供独特的功能，这也意味着在执行 Duolink ® 原位检测时，您的一抗必须来自于哪个物种不再有任何限制。
应用说明
待偶联抗体的浓度必须为 1 mg/mL。不得使用大于 20 mL 的体积进行偶联。抗体必须在无胺缓冲液中，理想的 PBS。缓冲液应不含载体，但可能含有 0.1%BSA、5% 海藻糖和 0.02% 叠氮化钠。
- 使用分成两半的单克隆抗体研究同源二聚体。一个用加性寡核苷酸标记，另一个用负性寡核苷酸标记。
- 使用来自相同种属的抗体：使用来自相同种属的两种一抗研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质修饰或单一蛋白质。用正寡核苷酸标记其中一种抗体，用负寡核苷酸标记另一种抗体
- 使用来自任何物种的抗体：研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质修饰或单一蛋白质，使用来自小鼠、兔或山羊以外物种的一种或两种一抗。用正寡核苷酸标记您的一个二抗，用负寡核苷酸标记另一个二抗。或者，将一种标记的二抗与标准二抗 Duolink®原位 PLA 探针结合。
在标准免疫荧光 (IF)、免疫组织化学 (IHC) 或免疫细胞化学 (IHC) 分析中测试您的初级抗体（IgG类、单克隆或多克隆），以确定最佳固定、阻断和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片器细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定的、石蜡包埋 (FFPE) 或组织（新鲜或冷冻）。没有要求最小数量的细胞。
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特点和优势
- 不需要过度表达或基因操作
- 高特异性（假阳性更少）
- 滚环扩增导致的单分子灵敏度
- 相对量化是可能的
- 不需要特殊设备
- 比FRET更快更简单
- 与co-IP相比，准确性更高
- 可发布的结果
组分
本产品由以下成分组成：
- Duolink ® In Situ 寡核苷酸 MINUS– 一瓶冻干的活化 MINUS 寡核苷酸，用于 20 μg 抗体的一次偶联
- 偶联缓冲液 – 用于偶联反应的缓冲液
- 终止试剂-终止偶联反应
- 保存液 – 保存制备的 PLA 探针的缓冲液（偶联抗体）
- 20x 检定试剂– 加入实验者优化抗体稀释液的试剂
- 封闭液-使用 Duolink ® 进行原位染色前，封闭样本
- PLA 探针稀释液-用于将 PLA 探针（结合抗体）稀释至最终试验浓度的缓冲液
其他说明
Duolink®邻位连接技术（PLA®）允许在固定细胞和组织样本中内源检测单分子水平的蛋白质相互作用、翻译后修饰和蛋白表达水平。
遵照 Duolink ®原位 Probemaker 方案 使用 Duolink ®原位探针制造商 PLUS 和 MINUS。本产品可应用于 Duolink ® 原位荧光方案 和 Duolink ® 原位明场方案 ，具体取决于使用的检测试剂。有关详细信息，请参阅 创建您自己的 (PLA ®) 探测 。
请访问我们的Duolink® PLA资源中心了解如何运行Duolink®实验、应用、故障排除等信息。
遵照 Duolink ®原位 Probemaker 方案 使用 Duolink ®原位探针制造商 PLUS 和 MINUS。本产品可应用于 Duolink ® 原位荧光方案 和 Duolink ® 原位明场方案 ，具体取决于使用的检测试剂。有关详细信息，请参阅 创建您自己的 (PLA ®) 探测 。
请访问我们的Duolink® PLA资源中心了解如何运行Duolink®实验、应用、故障排除等信息。
法律信息
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
警示用语：
Warning
危险声明
危险分类
Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1
WGK
WGK 3
法规信息
常规特殊物品
含少量动物源组分生物产品
Foivos-Filippos Tsokanos et al.
The EMBO journal, 35(10), 1058-1076 (2016-03-19)
Amino acids regulate TOR complex 1 (TORC1) via two counteracting mechanisms, one activating and one inactivating. The presence of amino acids causes TORC1 recruitment to lysosomes where TORC1 is activated by binding Rheb. How the absence of amino acids inactivates
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
Lan Dan et al.
Haematologica, 97(4), 551-559 (2011-12-31)
Inhibitors of nicotinamide phosphoribosyltransferase have recently been validated as therapeutic targets in leukemia, but the mechanism of leukemogenic transformation downstream of this enzyme is unclear. Here, we evaluated whether nicotinamide phosphoribosyltransferase's effects on aberrant proliferation and survival of myeloid leukemic
Ola Söderberg et al.
Nature methods, 3(12), 995-1000 (2006-10-31)
Cellular processes can only be understood as the dynamic interplay of molecules. There is a need for techniques to monitor interactions of endogenous proteins directly in individual cells and tissues to reveal the cellular and molecular architecture and its responses
Melanie Spears et al.
The Journal of pathology, 227(4), 481-489 (2012-03-21)
The PI3K/Akt signal transduction pathway plays an important role in cancer progression and cell survival. Akt activation is associated with poor outcome in endocrine-treated breast cancer, whereas high levels of cytoplasmic Akt2 are associated with an improved overall survival. Proximity
商品
Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
正确地准备、设置和执行 Duolink® PLA 实验方案需要考虑的因素。
Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.
包括建议和技巧、常见问题解答和基本故障排除的支持信息。
实验方案
Duolink®试剂盒使用原位PLA®技术（一种邻位连接检测技术）准确、客观地量化单个蛋白质，以及这些蛋白在未修饰细胞和组织中的互作和修饰。
Duolink® kits use in situ PLA® technology for accurate quantification of individual proteins, interactions, and modifications in cells and tissue.
相关内容
Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay
利用邻位连接技术对蛋白质互作、翻译后修饰和低表达蛋白进行检测、定量和成像应用。
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