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Merck
CN

RPOLT3-RO

Roche

T3 RNA 聚合酶

from Escherichia coli HB101

别名:

mRNA, 聚合酶

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About This Item

UNSPSC代码:
12352204

生物来源

Escherichia coli (HB101)

质量水平

检测方案

100% (SDS-PAGE)

形式

solution

比活

≥20 U/μL

分子量

100 kDa (single polypeptide chain)

包装

pkg of 1,000 U (11031163001)
pkg of 5,000 U (11031171001)

制造商/商品名称

Roche

浓度

<0.1 % (w/w)

技术

DNA sequencing: suitable
Northern blotting: suitable
Southern blotting: suitable
hybridization: suitable

颜色

colorless

pH值(酸碱度)

7.9 (39 °F)
8.0 (68 °F)

溶解性

water: miscible

适用性

suitable for molecular biology

NCBI登记号

UniProt登记号

应用

genomic analysis
life science and biopharma

异质活性

Nicking activity 150 units, none detected
RNases 150 units
endonucleases 150 units, none detected

储存温度

−20°C

基因信息

Escherichia coli ... rpoB(948488)

一般描述

使用该酶,可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记,或用 [α-32P]-或[α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶,对其启动子具有高特异性。只有位于 T3 启动子下游的 DNA 才会被转录。

特异性

启动子特异性
T3 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性,仅转录噬菌体 T3 DNA 或克隆到 T3 启动子下游的 DNA。
热失活:通过加入 2 μl 0.2M EDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 来终止反应。

应用

T3 RNA 聚合酶可以从克隆 DNA 模板(位于 T3 启动子下游)转录 RNA。使标记的 NTP 可以合成高度标记的 RNA。合成的 RNA 可用于许多应用,包括:
  • RNA 或 DNA 印迹技术
  • 原位杂交
  • RNase 保护研究:将酶合成的转录物用作前体 RNA,用于 RNA 剪接和加工的研究。
  • 在转录反应期间,通过在 GTP 或 ATP 上过量添加 m7GpppG 或 m7GpppA,在体外合成加帽的 RNA。产生的反义 RNA 可导入细胞中,抑制相应基因的表达。

包装

1 个试剂盒包含 2 种组分

质量

根据当前的质量控制程序测试不含内切核酸酶、切割活性和 RNA 酶。使用 SP6/T7 转录试剂盒进行功能测试。

产品规格

体积活性: =20 U/μl
杂交探针的合成:T3 RNA 聚合酶允许高效产生均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针,以及原位杂交。
合适的标记:转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP 或荧光素-12-UTP 进行非放射性标记。它们还可以用 [a-32P]-或 [a-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。

注意:罗氏拥有 10 倍浓缩的 RNA 标记混合物,专为 DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物适用于 T3 RNA 聚合酶。

单位定义

一个单元是在 +37°C 下,60 分钟内,在酸可沉淀的 RNA 产物中掺入 1 nMol CMP 的酶活性。

体积活性:≥20 U/μl

制备说明

活化剂:BSA/精胺

储存及稳定性

保存于密闭容器内,置于干燥通风处。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl

  • Transcription Buffer 10x concentrated

象形图

Exclamation mark

警示用语:

Warning

危险声明

危险分类

Eye Irrit. 2

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 2

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

常规特殊物品
含少量动物源组分生物产品

分析证书(COA)

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