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Merck
CN
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安全信息

RPOLSP6-RO

Roche

SP6 RNA聚合酶

from Escherichia coli BL 21/pSR3

别名:

mRNA, 聚合酶

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About This Item

UNSPSC代码:
12352204

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生物来源

Escherichia coli (BL 21/pSR3)

质量水平

100

方案

100% (SDS-PAGE)

表单

solution

比活

≥20 U/μL

分子量

96  kDa (Single polypeptide chain)

包装

pkg of 1,000 U (10810274001)
pkg of 5,000 U (11487671001)

制造商/商品名称

Roche

技术

DNA sequencing: suitable
Northern blotting: suitable
Southern blotting: suitable

颜色

colorless

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66825U

BIOshell A400 Protein C4, 3.4 μm HPLC Column

matrix

spherical silica particle platform, superficially porous particle

matrix

spherical silica particle platform, superficially porous particle

matrix

spherical silica particle platform, superficially porous particle

matrix

spherical silica particle platform, superficially porous particle

separation technique

reversed phase

separation technique

reversed phase

separation technique

reversed phase

separation technique

reversed phase

particle size

3.4 μm

particle size

3.4 μm

particle size

3.4 μm

particle size

3.4 μm

matrix active group

C4 (butyl) phase

matrix active group

C4 (butyl) phase

matrix active group

C4 (butyl) phase

matrix active group

C4 (butyl) phase

pore size

400 Å

pore size

400 Å

pore size

400 Å

pore size

400 Å

technique(s)

HPLC: suitable, UHPLC-MS: suitable, LC/MS: suitable, UHPLC: suitable

technique(s)

HPLC: suitable, LC/MS: suitable, UHPLC-MS: suitable, UHPLC: suitable

technique(s)

HPLC: suitable, LC/MS: suitable, UHPLC-MS: suitable, UHPLC: suitable

technique(s)

HPLC: suitable, LC/MS: suitable, UHPLC-MS: suitable, UHPLC: suitable

一般描述

利用该系统能够获得均匀标记的单链RNA。转录物可以用生物素或DIG-11-UTP标记，或者使用[α-32P]或[α-35S]标记的核苷酸进行放射性标记，以获得高比活性。

内容物：
  • SP6 RNA聚合酶，≥20 U/μl，溶于缓冲液，pH 7.9
  • 转录缓冲液，10倍浓缩

特异性

启动子特异性

SP6 RNA聚合酶具有极强的启动子特异性，仅转录噬菌体SP6 DNA或SP6启动子下游的克隆DNA（例如pSPTBM20；pSPTBM21）。

热灭活：通过加入 2 μl 0.2 M EDTA（pH 8.0）和/或加热至65℃来终止反应。

应用

SP6 RNA聚合酶能够以转录SP6启动子下游的克隆DNA为模板，转录合成相应的RNA。可以用标记的NTP进行合成，获得高度标记的RNA。合成的RNA可用于许多应用，包括：
  • RNA或DNA印迹技术
  • 原位 杂交[1][2][3]
  • RNA酶保护研究：由酶合成的转录物可用作前体RNA，以研究RNA剪接和加工。
  • 在转录反应期间，通过在GTP或ATP上过量添加m7GpppG或m7GpppA而在 体外 合成加帽RNA。将得到的反义RNA引入细胞，可抑制相应基因的表达。
  • 合成反义RNA探针[4]

质量

测试缓冲液
40 mM Tris-HCl，pH 8.0 (+20°C)，6 mM MgCl2，10 mM二硫苏糖醇，2 mM亚精胺，pH约为8.0 (+20°C).
无核酸内切酶
1.将1 μgλDNA和SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液，在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无λDNA降解。
2.将1 μg λDNA的Eco RI/Hind III片段与SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液，在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表带型无变化。
无切割活性
将1 μg pBR322 DNA和SP6 RNA聚合酶溶于25μl测试缓冲液，在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无超螺旋结构解旋。
无RNA酶
将4 μg MS2 RNA和SP6 RNA聚合酶溶于50μl测试缓冲液，在+37℃下一起孵育4小时。酶单位数> 30 U代表无MS2 RNA降解。
在转录分析中的性能
使用SP6/T7转录试剂盒（目录号10 999 644 001）对SP6 RNA聚合酶进行功能测试。使用0.5 μg pST18 neo DNA进行标准检测，用Eco RI酶切并使用50 mCi [alpha-32P] CTP, [400 Ci/mmol (15 TBq/mmol)]标记，20分钟内的掺入率给出>50%的输入放射性。

产品规格

杂交探针的合成： SP6 RNA聚合酶能够高效生产均匀标记的RNA。这种标记RNA可用作Southern、Northern和斑点印迹以及原位杂交的杂交探针。
合适的标记物：转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP或荧光素-12-UTP进行非放射性标记。还可以用 [a-32P]- 或[a-35S]-标记的核苷酸进行放射性标记，以获得高比活性。

注意：罗氏拥有10倍浓缩的RNA标记混合物，专为DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物与SP6 RNA聚合酶配合良好。

单位定义

一个酶活性单位是在+37°C下，在60分钟内向酸可沉淀的RNA产物中掺入1 nmol CMP所需的酶活性。

体积活性：≥20 U/μl

制备说明

活化剂：BSA/精胺

储存及稳定性

保存于密闭容器内，置于干燥通风处

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

仅试剂盒组分

产品编号
说明
  • SP6 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
  • Transcription Buffer 10x concentrated

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产品编号
说明
价格

象形图

Exclamation mark
GHS07

警示用语：

Warning

危险声明

H319

危险分类

Eye Irrit. 2

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(°F)

does not flash

闪点(°C)

does not flash

法规信息

常规特殊物品
含少量动物源组分生物产品

历史批次信息供参考:

分析证书(COA)

Lot/Batch Number
63831722
63831721
18093536
18093535
18093533

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