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用途
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions
质量水平
特点
dNTPs included: no
hotstart
制造商/商品名称
Roche
包装
pkg of 500 x 20 μL reactions (04673484001)
pkg of 5000 x 20 μL reactions (04673492001)
技术
RT-qPCR: suitable
qPCR: suitable
输入
purified DNA
检测方法
probe-based
一般描述
FastStart™ SYBR® Green预混液是不含ROX染料的即用型热启动反应混合物,用于在实时PCR系统(LightCycler®仪器除外)上进行定量聚合酶链式反应(qPCR)和逆转录(RT)-qPCR。该预混液简化了DNA检测和分析反应的试剂制备。搭配实时PCR仪、适当的PCR引物和水解探针,FastStart™ TaqMan®预混液可实现对已知DNA序列的灵敏检测和定量。
SYBR® Green I是一种DNA双链特异性染料。在DNA合成的每个阶段,包含在反应液中的SYBR® Green I染料可与扩增的PCR产物相结合。扩增子可通过其荧光而被检测到。
热启动的实验方法已证明可显著提高特异性、灵敏度及PCR产量。在FastStart™ Taq DNA聚合酶的某些氨基酸残基上的热不稳定性封闭基团使得改造过的酶在室温下失活。因此,在引物可以非特异性结合的阶段并没有发生延伸。FastStart™ Taq DNA聚合酶可在高温(即+95°C的预孵育步骤)下通过将封闭基团去除而激活。
FastStart™ SYBR® Green预混液可用于任何DNA或cDNA靶标的扩增和检测,包括GC或AT富含序列。不过用户需根据待用实时PCR仪的反应条件调整检测方案,并针对各目标序列设计特异性引物。
将预混液与我们的Transcriptor第一链cDNA合成试剂盒结合以在两步法qRT-PCR中获得优异结果。
应用
- 用于腺相关病毒(AAV)滴度定量的定量聚合酶链式反应(qPCR)
- 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)相关的不同Col6a1-3基因表达水平的检测qPCR
- G蛋白偶联雌激素受体-1(GPER)mRNA的实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)
- 基因表达研究的qRT-PCR
FastStart™ SYBR® Green预混液适配除 LightCycler®仪器以外的任何实时qPCR仪器。
特点和优势
- 提高 PCR 灵敏度和特异性:
- 避免高估 qPCR 结果:
- 扩增并检测广泛的 DNA 或 cDNA 靶标:
- 使用 LightCycler 以外的任何实时 PCR® 仪器:
- 节省 qPCR 制备的时间和精力:
- 防止携带污染导致的假阳性:
组分
质量
其他说明
原则上,FastStart SYBR Green Master 可用于任何 DNA 或 cDNA 靶标的扩增和检测,包括富含 GC 或 AT 的靶标。但是,对于每个靶标,你将需要:
- 以使检测方案适应实时 PCR 仪的反应条件,
- 为靶标设计特异性 PCR 引物。
有关一般建议,请参阅实时 PCR 仪器的操作员手册。
有两种可用形式
主混合物有两种形式 - 一种含有 ROX 参比染料,另一种不含 ROX。
防止携带污染
本主混合物包含 dUTP,dUTP 将整合到 PCR 产品中,以帮助防止携带污染导致的假阳性。在随后的 PCR 中,您可以加入尿嘧啶-DNA 糖基化酶来降解任何含尿嘧啶的残留污染物(来自之前 PCR 的扩增产物)。
qRT-PCR
将此主混合物与我们的 Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit 结合,进行两步 qRT-PCR。该试剂盒提供极好的结果,与所有实时 PCR 仪器一起高效工作。
法律信息
储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
does not flash
闪点(°C)
does not flash
法规信息
商品
Watch these videos to learn how real time or quantitative PCR (qPCR) works and the benefits of both the SYBR Green-based and probe-based methods of qPCR assay.
PCR master mix simplifies PCR/RT-PCR with components like DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, and buffer, available commercially or DIY.
The purpose of Hot Start PCR is to inhibit the PCR reaction in order to reduce nonspecific amplification, prevent the formation of primer dimers, and increase product yields.
热启动PCR的目的在于抑制PCR反应,从而减少非特异性扩增、防止引物二聚体形成并提高产物产量。
相关内容
Polymerase chain reaction (PCR) is a technique for amplifying nucleic acid molecules and is commonly used in many applications, including RT-PCR, hot start PCR, end point PCR and more.
PCR是分子生物学的核心技术,功能强大。可在体外高效快速地对不同来源的特定DNA或RNA序列进行酶扩增。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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