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生物来源
mouse
质量水平
抗体形式
purified immunoglobulin
抗体产品类型
primary antibodies
克隆
6-11B-1, monoclonal
种属反应性
sea urchin, bovine, monkey, Chlamydomonas, Drosophila, mouse, rat-kangaroo, human
技术
dot blot: suitable
electron microscopy: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable
同位素/亚型
IgG2bκ
GenBank登记号
UniProt登记号
运输
wet ice
靶向翻译后修饰
acetylation (Lys40)
基因信息
human ... TUBA1A(7846)
一般描述
微管是由α-/β-微管蛋白异二聚体组成的细胞骨架细丝,其从头到尾自组装形成原丝并横向组装形成空心管。各种翻译后修饰(PTM),包括乙酰化、聚谷氨酰化、聚糖基化、脱酪氨酸、磷酸化和棕榈酰化,可以调节微管蛋白的聚合特性和/或它们与微管相关蛋白(MAP)和运动蛋白的相互作用。已知纺锤体、轴突和纤毛中的细胞质微管和微管的子集包含通过赖氨酸40(K40)的ε-氨基乙酰化的α-微管蛋白。GNAT赖氨酸乙酰转移酶家族成员MEC-17(或α-微管蛋白乙酰转移酶/αTAT)催化K40乙酰化,而已知HDAC6和sirtuin2(SIRT2)催化微管蛋白脱乙酰化。实验证据表明,K40乙酰化引发α-微管蛋白用于进一步的PTM,这不能通过以后的K40ac脱乙酰作用来逆转。随后,天然微管中的乙酰化和脱乙酰化的α-微管蛋白在结构上不同于未乙酰化的α-微管蛋白(以前从未将其K40乙酰化)。
特异性
实验证据表明,天然微管中乙酰化和脱乙酰化的α-微管蛋白在结构上与未乙酰化的α-微管蛋白不同,并且克隆6-11B-1识别乙酰化和脱乙酰化的α-微管蛋白,但不识别未乙酰化(从未乙酰化)的α-微管蛋白。虽然6-11B-1免疫染色模式类似于正常循环细胞上的乙酰基-Lys40抗体,但在解释使用该mAb对通过外源性脱乙酰基酶表达或通过化学方法进行微管蛋白脱乙酰基操作的细胞的免疫染色结果时,必须谨慎行事。
免疫原
海胆精子轴突的15 S动力蛋白部分。
应用
研究子类别
粘附(CAMs)
粘附(CAMs)
研究类别
细胞结构
细胞结构
蛋白质印迹分析:4.0 µg/mL的代表性批次在10 µg小鼠脑组织裂解物中检测到乙酰-α微管蛋白。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次在培养的正常人肾上皮细胞中检测到乙酰化α-微管蛋白(由University of Kansas Medical Center的Christopher Ward博士提供)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在海胆精子轴突裂解物中检测到α-微管蛋白,但在海胆卵中紫杉醇稳定的微管的裂解物中未检测到α-微管蛋白(Piperno, G., and Fuller, M.(1985).J Cell Biol.101(6):2085-2094)。
斑点印迹分析:一个代表性批次在来自海胆精子轴突提取物的离子洗涤剂Sarkosyl可溶和不可溶级分中检测到α-微管蛋白(Piperno, G., and Fuller, M.(1985).J Cell Biol.101(6):2085-2094)。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次通过荧光免疫细胞化学在COS-7绿猴肾成纤维细胞和Ptk2大鼠袋鼠肾上皮细胞中检测到乙酰化和脱乙酰化的α-微管蛋白,但未检测到未乙酰化的α-微管蛋白(Soppina V.,et al.(2012).PLoS One.7(10):e48204)。
电子显微镜分析:在有或无SIRT2催化的脱乙酰作用情况下,已显示克隆6-11B-1的Fab片段可染色来自纯化牛脑微管蛋白的体外聚合紫杉醇稳定的微管(Soppina V.,et al.(2012).PLoS One.7(10):e48204)。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次在培养的正常人肾上皮细胞中检测到乙酰化α-微管蛋白(由University of Kansas Medical Center的Christopher Ward博士提供)。
蛋白质印迹分析:一个代表性批次在海胆精子轴突裂解物中检测到α-微管蛋白,但在海胆卵中紫杉醇稳定的微管的裂解物中未检测到α-微管蛋白(Piperno, G., and Fuller, M.(1985).J Cell Biol.101(6):2085-2094)。
斑点印迹分析:一个代表性批次在来自海胆精子轴突提取物的离子洗涤剂Sarkosyl可溶和不可溶级分中检测到α-微管蛋白(Piperno, G., and Fuller, M.(1985).J Cell Biol.101(6):2085-2094)。
免疫细胞化学分析:一个代表性批次通过荧光免疫细胞化学在COS-7绿猴肾成纤维细胞和Ptk2大鼠袋鼠肾上皮细胞中检测到乙酰化和脱乙酰化的α-微管蛋白,但未检测到未乙酰化的α-微管蛋白(Soppina V.,et al.(2012).PLoS One.7(10):e48204)。
电子显微镜分析:在有或无SIRT2催化的脱乙酰作用情况下,已显示克隆6-11B-1的Fab片段可染色来自纯化牛脑微管蛋白的体外聚合紫杉醇稳定的微管(Soppina V.,et al.(2012).PLoS One.7(10):e48204)。
该抗乙酰基-α微管蛋白抗体(克隆6-11B-1)经验证可用于蛋白质印迹法、免疫细胞化学、斑点印迹法和电子显微镜法检测乙酰基-α微管蛋白。
质量
通过蛋白质印迹法在HeLa细胞裂解物中进行评价。
蛋白质印迹分析:4.0 µg/mL该抗体在10 µg HeLa细胞裂解物中检测到乙酰-α微管蛋白。
蛋白质印迹分析:4.0 µg/mL该抗体在10 µg HeLa细胞裂解物中检测到乙酰-α微管蛋白。
目标描述
观测分子量〜50 kDa
外形
形式:纯化
纯化的小鼠单克隆IgG2bκ抗体,溶于含0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠的缓冲液中。
纯化蛋白G
储存及稳定性
自接收之日起,在2-8°C下可稳定保存1年。
其他说明
浓度:请参考特定批次的数据表。
法律信息
GenBank is a registered trademark of United States Department of Health and Human Services
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储存分类代码
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
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