HMG-CoA还原酶抗体，克隆IgG-A9

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（EC 1.1.1.34；UniProt P00347；也称HMG-CoA还原酶）由灰仓鼠（中国仓鼠）的HMGCR基因（基因ID 100756363）编码。HMG-CoA还原酶可催化HMG-CoA转化为甲羟戊酸，是甲羟戊酸-异戊二烯类化合物生物合成（MIB）途径的限制性酶，负责生成胆固醇和其他异戊二烯类化合物，以及蛋白质异戊二烯化所需的法尼基焦磷酸盐（FPP）。HMG-CoA还原酶受到低密度脂蛋白（LDL）通过LDL受体内化和降解产生的胆固醇以及氧化胆固醇类物质的抑制。HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂诱导肝脏中LDL受体的表达，进而增加血浆LDL的分解代谢，降低血浆胆固醇的浓度。HMG-CoA还原酶是一种多跨膜内质网蛋白，具有N端甾醇敏感结构域（SSD；a.a.61-218）和C端催化结构域（a.a.450-888），其活性在SSD与胆固醇结合时受到抑制。许多研究表明HMG-CoA还原酶和甲羟戊酸途径参与肿瘤发生。

克隆IgG-A9靶向HMC-CoA还原酶催化结构域内的表位（a.a. 450 887）。

Membrane preapration from compactin-adapted CHO cells (Liscum, L., et al. (1983).J. Biol. Chem. 258(13) 8450-8455).

可使用这种小鼠HMG-CoA还原酶单克隆抗体（克隆IgG-A9，货号MABS1233）检测HMG CoA还原酶，该抗体经验证可用于免疫细胞化学、免疫沉淀和蛋白质印迹。

研究类别
信号传导

蛋白印迹分析：取用 0.01 mM 美伐他汀处理过夜的 CHO7 细胞的15 µg膜提取物，检测1:100 稀释的代表性批次（数据来源：Linda Donnelly, Department of Molecular Genetics, UT Southwestern Medical Center, Dallas, TX, USA）。

免疫细胞化学分析：多聚甲醛固定细胞，0.1% Triton X-100 透化，在有或没有 25-羟基胆固醇 (25-HC) 的情况下与美伐他汀、甲羟戊酸和 MG-132 一起培养，代表性批次通过间接免疫荧光染色检测到 HMG CoA 还原酶阳性 ER 膜结构 (Hartman, I.Z., et al. (2010).J. Biol. Chem. 285(25):19288-19298)。

免疫沉淀分析：从美伐他汀驯服的 CHO 细胞 (UT-1) 提取物中，代表性批次免疫耗竭 HMC-CoA 还原酶活性(Liscum, L., et al. (1983).J. Biol. Chem. 258(13) 8450-8455).

蛋白质印迹分析：在存在美伐他汀、MG-132（含或不含甲羟戊酸）的情况下，在用脂蛋白缺乏血清培养 CHO-K1 细胞，代表性批次检测到25-羟基胆固醇 (25-HC) 处理诱导的 HMC-CoA 还原酶从 ER 膜移位到细胞溶胶和脂质滴中。细胞 VCP 敲低可阻止甾醇诱导的 HMC-CoA 还原酶胞浆易位，但不能阻止脂滴易位 (Hartman, I.Z., et al. (2010).J. Biol. Chem. 285(25):19288-19298)。

蛋白质印迹分析：在存在蛋白酶体抑制剂 MG-132 的条件下，用美伐他汀和甲羟戊酸培养SV-589 人成纤维细胞，代表性批次检测到25-羟基胆固醇 (25-HC) 处理诱导的 HMC-CoA 还原酶泛素化。细胞中敲低 gp78A（而非 gp78B 或 Hrd1）可降低 25-HC 诱导的 HMC-CoA 还原酶泛素化 (Song, B.L., et al. (2005).Mol. Cell. 19(6):829-840)。

蛋白质印迹分析：用美伐他汀和甲羟戊酸培养SV-589 人成纤维细胞，代表性批次检测到 25-羟基胆固醇 (25-HC) 处理诱导的 HMC-CoA 还原酶降解。gp78A、VCP 或 Insig-1/-2 的细胞敲低抑制了甾醇诱导的 HMC-CoA 还原酶降解(Song, B.L., et al. (2005).Mol. Cell. 19(6):829-840)。

蛋白质印迹分析：用美伐他汀和甲羟戊酸培养的 HEK-293S 细胞，代表性批次在膜和核组分中检测到HMC-CoA 还原酶。用 25-羟基胆固醇 (25-HC) 进行额外处理会导致 HMC-CoA 还原酶降解(Sever, N., et al. (2003).Mol. Cell. 11(1):25-33)。

蛋白质印迹分析：在美伐他汀驯服的 CHO 细胞 (UT-1) 中，代表性批次检测到HMC-CoA 还原酶表达上调，而在 LDL 存在下培养的 UT-1 细胞中，HMC-CoA 还原酶表达丧失 (Liscum, L., et al. (1983).J. Biol. Chem. 258(13) 8450-8455).

蛋白质印迹分析：在饮食中添加考来烯胺和美维诺林的大鼠肝微粒体制剂中，代表性批次检测到HMC-CoA 还原酶上调幅度大于仅添加考来烯胺的大鼠，而添加胆固醇考来烯胺和美维诺林的肝脏 HMC-CoA 还原酶下调 (Liscum, L., et al. (1983).J. Biol. Chem. 258(13) 8450-8455)。

通过亚型检测进行鉴别确认。

亚型分析：通过亚型检测确认该单克隆抗体为小鼠IgG1。

观测值〜92 kDa。计算分子量：97.08 kDa（仓鼠），97.48/92.02/99.75 kDa（人同工型1/2/3（HMGCR-1b）），96.69 kDa（大鼠）。在一些裂解液中可能会观察到未表征的条带。

在含 0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4），150 mM NaCl 和 0.05％ 叠氮化钠的缓冲液中的纯化的小鼠 IgG1。

形式：纯化

纯化蛋白G。

自收到之日起，在2-8°C条件下可稳定保存1年。

浓度：请参考特定批次的数据表。

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