Anti-KRAS Antibody

GTPase KRas（UniProt P01116；也称为 c-K-ras、c-Ki-ras、K-Ras 2、Ki-Ras）由人中的 KRAS（也称为 KRAS2、RASK2）基因（基因 ID 3845）编码。Ras 蛋白是小的 GTPases，控制生长、增殖和分化相关的细胞信号传导。哺乳动物基因组包含三个 Ras 基因（HRAS、NRAS 和 KRAS），其编码四个 GTPases，其中两个（K-Ras4A 和 K-Ras4B）是通过两个可变的 4th 外显子从 KRAS 基因转录而来的。Ras 蛋白在外显子 1-3（aa 1-165）编码的序列中具有几乎相同的序列同源性，但在其 C 末端 24 个氨基酸，外显子 4 编码的高变区（HVR）中却有所不同。前 165 个氨基酸形成催化性 G 结构域，介导 GDP/GTP 结合并与效应子、交换因子和 GTPase 激活蛋白（GAP）结合，而 Ras 膜定位需要 C 端 HVR，这是 Ras 功能必须的过程。除了去除起始密码子蛋氨酸（Met1）外，Ras 蛋白还通过 Cys186 的法尼基化，然后通过蛋白水解其 C 端三个氨基酸（aa187-189）和新形成的 C 端的羧基甲基化异戊二烯半胱氨酸，而进行翻译后修饰。H-Ras、N-Ras 和 K-Ras4A 在 C 端附近的半胱氨酸残基上进一步被棕榈酰化（H-Ras 中的 Cys181/Cys184、N- 和 K-Ras 中的 Cys181），而 K-Ras4B 缺乏棕榈酰化位点。棕榈酰化对于将 H- 和 N-Ras 靶向质膜（PM）是必需的，而 K-Ras4A 和 K-Ras4B 包含一系列赖氨酸，这些赖氨酸构成通过静电相互作用能够与 PM 内部小叶相互作用的多元区域（PBR）。

该兔多克隆抗体特异性检测到重组 K-Ras4A，但未检测到 K-Ras4B、H-Ras 或 N-Ras（Tsai, F.D., et al. (2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(3):779-784) 通过靶向剪接同工型 K-Ras4A（异构体 2A）独有的 C 端区域序列，而在剪接同工型 K-Ras4B（异构体 2B）没发现该序列。

KLH-偶联的线性肽，其对应于人 K-Ras4A 的 C 末端附近的序列。

使用该兔多克隆抗 K-Ras4A 抗体（货号 ABC1442，经过验证可用于蛋白质印迹）检测 K-Ras4A。

研究类别
凋亡 & 癌症

蛋白质印迹分析：一个代表性批次检测到重组 K-Ras4A，但未检测到 K-Ras4B、H-Ras 或 N-Ras（Tsai, F.D., et al. (2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(3):779-784）。

蛋白质印迹分析：一个代表性批次使用 pan-Ras mAb（货号 OP40），克隆 RAS 10 从来自大肠癌（HCT116、HT29 和 CaCo-2）和 T24 尿路上皮癌细胞裂解物总 Ras 免疫沉淀物中检测到 K-Ras4A。(Tsai, F.D., et al. (2015).Proc.Natl.Acad.Sci. U. S. A. 112(3):779-784）。

通过蛋白质印迹法对 HEK293 细胞裂解液进行了评估。

蛋白质印迹分析：该抗体以 1：5,000 稀释度在 20 µg 来自转染的 HEK293 细胞的裂解物中检测到了外源表达的 K-Ras4A GFP 融合蛋白。

计算得出的分子量：21.66 kDa（前体形式，aa1-189）和 21.17 kDa（成熟，aa2-186）。

亲和纯化。

在含 0.1 M Tris-甘氨酸（pH 7.4）150 mM NaCl 和 0.05％ 叠氮化钠的缓冲液中的纯化的兔多克隆抗体

自收到之日起，在 2-8°C 条下可稳定保存 1 年。

浓度：请参考特定批次的数据表。

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