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一般描述
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。 每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物（通过qPCR对每个批次进行检测），以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列，使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体，以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H3组包括纯化的兔多克隆抗体和正常兔IgG抗体，可用于证明乙酰基组蛋白H3抗体能够沉淀与乙酰基组蛋白H3相关的染色质。qPCR引物包括人GAPDH启动子的侧翼，并产生166个碱基对的PCR产物。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H3组包括纯化的兔多克隆抗体和正常兔IgG抗体，可用于证明乙酰基组蛋白H3抗体能够沉淀与乙酰基组蛋白H3相关的染色质。qPCR引物包括人GAPDH启动子的侧翼，并产生166个碱基对的PCR产物。
核小体的核心成分。核小体将DNA包裹并压缩到染色质中，从而限制了DNA进入需要DNA作为模板的细胞机制的可及性。它们在转录调节、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中起着核心作用。DNA的可及性是通过对组蛋白进行复杂的翻译后修饰（也称为组蛋白编码）和核小体重塑来调节的。乙酰化通常与基因激活有关。Lys-10（H3K9ac）上的乙酰化会损害Arg-9（H3R8me2s）上的甲基化。Lys-19（H3K18ac）和Lys-24（H3K24ac）上的乙酰化有利于Arg-18（H3R17me）处的甲基化。
特异性
根据抗体产生肽的序列，四膜虫预计会发生交叉反应。
识别乙酰基组蛋白H3
免疫原
乙酰基-组蛋白H3抗体针对对应于四膜虫组蛋白H3 ARTKQTAR[K*]STGG[K*]APRKQL(C)的氨基酸1-20的肽制备，其中K*被乙酰化）
应用
乙酰基组蛋白H3 ChIP验证的抗体 & 引物组包括ChIP级抗体 & 用于H3Ac染色质免疫沉淀的特异性对照PCR引物。
蛋白质印迹分析：
来自经5 mM丁酸钠处理24小时的HeLa细胞（泳道2）和未处理的HeLa细胞（泳道1）的酸提取蛋白通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上，并用抗乙酰化组蛋白H3（0.01 μg/mL）探测。
使用与HRP偶联的山羊-兔二抗和化学发光检测系统可视化蛋白质（请参见图）。
来自经5 mM丁酸钠处理24小时的HeLa细胞（泳道2）和未处理的HeLa细胞（泳道1）的酸提取蛋白通过电泳分离，转移到硝酸纤维素膜上，并用抗乙酰化组蛋白H3（0.01 μg/mL）探测。
使用与HRP偶联的山羊-兔二抗和化学发光检测系统可视化蛋白质（请参见图）。
包装
每组25次测定。每次染色质免疫沉淀约5 μg
质量
已通过染色质免疫沉淀法对HeLa核提取物进行常规评估。
目标描述
17 kDa
外形
形式：纯化
抗乙酰基组蛋白H3（兔多克隆IgG）。1个小瓶，包含125μg蛋白A纯化抗体，溶于125 μL储存缓冲液（含0.1 M Tris-甘氨酸、pH值7.4、0.15 M NaCl和0.05%叠氮化钠）。储存于-20°C。
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 uL体积的125 ug正常兔IgG。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶含有75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。储存于-20°C。
对于：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG
CGA
正常兔IgG。一个小瓶，包含125 uL体积的125 ug正常兔IgG。储存在-20 °C。
对照引物。一个小瓶含有75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。储存于-20°C。
对于：TAC TAG CGG TTT TAC GGG CG
REV: TCG AAC AGG AGG AGC AGA GAG
CGA
分析说明
对照
包括阴性对照抗体兔IgG和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
包括阴性对照抗体兔IgG和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
法律信息
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
WGK
WGK 2
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