无菌性试验

无菌检测程序广泛应用于多个行业的产品，包括食品和饮料制造商，但主要应用于制药和医疗领域，在这些领域，产品的无菌检测仍是微生物学家的一项至关重要且常规的工作。

• 药品无菌检测方法
• 医疗器械无菌检测方法
• 无菌检测工作流程

药品无菌检测方法

药典规定的药品无菌检测方法要求将样本分别在两种不同的培养基中进行培养。 无菌试验中使用两种不同类型的培养基，以促进残留厌氧菌、需氧菌及真菌的生长。通常使用液态硫代乙酸盐培养基（FTM）培养厌氧菌和部分需氧菌，而大豆酪蛋白水解物培养基（SCDM）通常用于培养真菌和需氧菌。 样本在检查前需分别于32.5 °C和22.5 °C下培养14天。培养基中出现的任何混浊现象可能表明有微生物生长，必须进行调查。药品无菌检测推荐采用两种方法：膜过滤法和直接接种法。

膜过滤无菌试验

如《美国药典》<71>、《欧盟药典》<2.6.1>及《日本药典》<4.06>所述，膜过滤无菌试验是可过滤药物的首选法规方法。 样品通过过滤罐中的0.45 µm膜滤器，并加入培养基进行培养。与其他方法相比，该无菌检测方法的灵敏度更高，因为整个样品或混合样品均通过单一滤器。过滤过程还能冲洗掉样品中可能导致浑浊或抑制微生物生长的成分，例如抗生素或防腐剂。

直接接种无菌检测

在直接接种法中，需无菌操作从样品容器中取出一小体积样品，直接接种到适量培养基中，随后进行培养。虽然该方法操作简单，但存在一些显著局限性。 由于只能将少量产品接种到培养基中，因此限制了检测的灵敏度。如果接种后样品出现浑浊，在培养期结束时，可能难以区分是微生物生长导致的浑浊还是其他原因造成的浑浊。此外，如果产品具有抗菌特性，则必须对样品进行中和处理，以免抑制微生物生长。

医疗器械无菌检测方法

建议采用直接转移无菌试验法对医疗器械进行无菌检测。在整个培养期间，待测器械与培养基直接接触，期间器械内部或表面的任何微生物都会生长和繁殖。 此外，对于输血和输液组件等具有中空管路且流体通道标注为无菌的产品，建议采用产品冲洗无菌检测法。该方法需用冲洗液冲洗产品管腔，将洗出液经膜过滤后置于适宜的培养基中进行培养。

无菌检测工作流程

1. 试验准备——将膜过滤装置的管路接入泵

2. 滤膜预润湿——对膜过滤装置进行预润湿，以优化过滤效果并最大限度减少产品在滤膜上的附着。

3. 样品过滤——将等量的产品过滤至两个罐中。微生物被孔径为0.45 µm的滤膜截留。

4. 冲洗——使用合适的冲洗液冲洗掉所有抑制性物质。

5. 培养基灌注——向膜过滤装置中注入 TSB 和 FTM 无菌培养基。

6. 培养时间——14天。

7. 最终检测结果——目视检查浊度/无浊度。