固相微萃取：常问问题解答

问题：我应该用什么SPME萃取头来提取一类分析物？

应考虑两个因素：

• 分析物的极性
• 分析物的挥发性和分子大小

极性分析物被吸引到极性相（例如聚丙烯酸酯和聚乙二醇PEG涂层）。薄膜较厚（100微米）的萃取头对挥发物较好，但也可用于挥发性较弱的化合物（需要较长的提取时间）。多孔萃取头（带有羧基或二乙烯基苯涂层）也可以留存较小的分析物，是C2-C6分析物的理想选择薄膜萃取头（7微米和30微米聚二甲基硅氧烷），更适合大分子。 

有关详细信息，请参阅SPME萃取头选择。

问题：如何提高SPME回收率？

• 选择最合适的萃取头（参见上一个问题）。
• 搅动或搅拌样品。
• 如果您正在进行顶空采样，请尽量减少顶空体积（<30%），选择合适的温度（40-90 °C）。如果温度过高，分析物可从萃取头上解吸。
• 样品中加入25%的NaCl，调节pH值（对酸降低pH值，对碱升高pH值）。
• 尽量减少样品中有机溶剂的用量。

问题：SPME可以定量的吗？

是的。每种分析物都需要校准曲线来确定线性范围。使用与样品中分析物性质相似的内标可提高精度。标准添加的用法最适用于复杂的矩阵。对于气相色谱/质谱分析，同位素是理想的内标。需要一致的提取条件和搅动或搅拌。

问题：如何量化手动SPME的结果？

对于手动SPME提取的可靠定量结果，我们推荐以下指南：

样品体积必须在样品间保持一致。对于直接浸入式应用，完全填充样品容器。对于顶空应用，将容器填充到1/2至3/4之间。

提取半挥发物时，使用一致的搅拌速度。如果速度不一致，精度会下降，特别是对于分配常数高的分析物。

保持样品中有机物含量的最低水平（<1%），并在所有样品中保持一致。大量的有机溶剂会极大地影响分配常数。一些溶剂（如甲醇）作为与水的共溶剂，可以降低提取的分析物的回收率。

使用与您的分析物相似的内标。内标有助于抵消提取变量。标准品制备很重要。按1-2mg/mL溶剂配制标准品，然后在提取前将0.05-5uL的标准品加入水样中。

保持样品间提取时间和温度的一致。提取时间一般为挥发物10分钟，半挥发物20-30分钟。

有关SPME一致结果的详细信息，请参阅公告923。

问题：如何延长SPME萃取头寿命？

大多数萃取头损伤是由针头弯曲导致的。弯曲通常发生在萃取头刺穿小瓶隔膜时。调整黑针深度计，使针头仅露出0.5-1厘米。刺穿小瓶隔膜，然后旋转针头深度计以便将针头拧入小瓶中。
保持注射口温度低于萃取头的最高推荐温度。在可能的情况下进行顶空取样，以尽可能减少高分子量化合物的提取或结转。

问题：基质太复杂。如何减少外来峰值？

• 在使用前对萃取头进行适当的调理。对萃取头进行较长时间的再处理。
• 检查入口衬垫。大多数峰值噪声是由衬垫中的隔膜颗粒引起的。
• 更换小瓶隔膜。
• 把进口温度降低20 °C左右。使用产生峰值的最低温度，并尽量减少结转。

问题：可以用SPME从有机溶剂中提取分析物吗？

我们不建议从有机溶剂中提取。但是，您可以使用极性有机溶剂上方的顶部空间提取分析物，但存在分布常数降低、溶胀造成萃取头损伤以及色谱图上出现较大溶剂峰的风险。

问题：顶空SPME与顶空分析仪相比有哪些优势？

在分析半挥发性和挥发性分析物时，顶空SPME与顶空分析仪相比具有几个重要的优点。

使用顶空分析仪捕集水基样品中的半挥发性分析物时，必须将样品加热至110 °C或更高。许多水分将与分析物一起转移。通常含分析物的体积较大，您必须在低温状态将分析物重新聚焦在色谱柱入口处。与分析物一起转移的水分可以冻结在细胞系上。

对于顶空SPME，样品通常只需要升温至40-60 °C。分析物会集中在萃取头上，水蒸气很少。然后，由于萃取头在进样口快速解吸，分析物通常解吸成聚焦的塞子——不需要低温。此外，顶空SPME样品体积很小，例如在4毫升小瓶中为3毫升。

即使是挥发性有机化合物（VOC）也可以以足够的速度从SPME萃取头上解吸，从而消除对低温的需求。使用Carboxen™/聚二甲基硅氧烷萃取头，以留存极易挥发的分析物（室温下的气体）。只有乙烷、甲烷和一些固定气体太小而不能留存在羧基颗粒的孔隙中。其它SPME萃取头适用于顶空SPME提取半挥发物。

使用顶空SPME或萃取头浸没SPME的决定几乎完全取决于分析物的蒸汽压。如果有明显的蒸汽压，那么顶空SPME是有利的；分析物的回收率比浸入式SPME更清洁、更快，萃取头的使用寿命更长。如果您拥有坚实的样品矩阵，那么顶空SPME是强制性的。