杜氏改良Eagle培养基F12(DMEM F12)
近年来,研究人员陆续报道了采用营养素、生长因子和激素取代血清,在无血清培养基中培养各种细胞系的方法。Mather和Sato(BBRC, 1985)报道在含有胰岛素、转铁蛋白、表皮生长因子、黄体生成素或促卵泡激素、生长调节素和生长激素的无血清培养基中,成功培养了Leydig和Sertoli细胞。
尽管其中的激素及其浓度专用于特定的细胞类型,但人们还是发现杜氏改良Eagle培养基(DMEM)与Ham's F-12营养混合液的1:1混合物最适于这类研究。这种混合物名为 DMEM/F12培养基,含有21种氨基酸、10种维生素、葡萄糖、铁和锌等成分。
DMEM/F12是比DMEM更加营养和复杂的培养基。配方中可加入HEPES缓冲液(终浓度15 mM)补偿无血清造成的缓冲能力损失。这种合成培养基不含任何血清、蛋白质、脂质或生长因子,因此需要根据细胞培养类型补充胎牛血清(FBS)等营养成分。某些商业配方可能含有谷氨酰胺或酚红。
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