一般描述
GenElute™ Direct mRNA Miniprep试剂盒提供了一种方便的格式,可直接从哺乳动物细胞和组织中分离聚腺苷化mRNA。直接mRNA分离程序是基于Badley的方法。 多达107个哺乳动物细胞或40毫克组织经溶解和搅匀,借助过滤柱或
机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中,RNase被消除。 加入氯化钠,在10分钟的孵育期间,聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集,RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中,然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后,用100 μl of 10 mM Tris-HCl,pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
机械高速搅拌器。在10分钟的蛋白酶K消化过程中,RNase被消除。 加入氯化钠,在10分钟的孵育期间,聚腺苷化RNA被捕获在寡聚(dT)聚苯乙烯珠上。为了进一步富集,RNA可以从珠粒释放到新鲜裂解液中,然后用原始珠粒重新捕获。在旋转柱中洗涤3次后,用100 μl of 10 mM Tris-HCl,pH 7.4洗脱纯化的mRNA。
应用
GenElute Direct Kit mRNA试剂盒提供了简便程序,用于从之前制备的总RNA或直接从哺乳动物细胞和组织中分离聚腺苷化mRNA。
特点和优势
- 在10分钟内,在不混合或摇晃的情况下,在oligo(dT)聚苯乙烯珠上捕获mRNA(图1)
- 40分钟内从总RNA中分离(图2)或60分钟内直接从细胞和组织中分离(图3)聚(A)+ mRNA
- 寡聚(dT)聚苯乙烯珠需要更少的清洗步骤
法律信息
GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
仅试剂盒组分
产品编号
说明
- Elution solution 1.5 mL
- Filtration columns with tubes 10 ea
- Lysis solution 20 mL
- 5 M NaCl 1.5 mL
- Oligo(dT)-polystyrene beads .3 mL
- Proteinase K 5 mg
- 40% Glycerol solution .6 mL
- Spin columns with tubes 10 ea
- Collection tube 10 ea
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警示用语:
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Met. Corr. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
法规信息
常规特殊物品
Molecular cancer, 6, 82-82 (2007-12-26)
Retinoids are potent growth inhibitory and differentiating agents in a variety of cancer cell types. We have shown that retinoids induce growth arrest in all pancreatic cancer cell lines studied, regardless of their p53 and differentiation status. However, the mechanism
Genes, 10(2) (2019-02-20)
Despite recent advances in N⁶-methyladenosine (m⁶A) biology, the regulation of crucial RNA processing steps by the RNA methyltransferase-like 3 (METTL3) in glioma stem-like cells (GSCs) remains obscure. An integrated analysis of m⁶A-RIP (RNA immunoprecipitation) and total RNA-Seq of METTL3-silenced GSCs
实验方案
Method for reverse transcription of RNA into DNA. Uses a premixed reagent that contains reverse transcriptase, dNTPs, primers, RNase inhibitor and buffer. Fast generation of cDNA.
将RNA逆转录成DNA的方法。使用含有逆转录酶、dNTP、引物、RNase抑制剂和缓冲液的预混试剂。快速合成cDNA。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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