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![N-[3-(2-呋喃基)丙烯酰基]-亮氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸](/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/805/876/96b5fb57-71c8-4c6b-b5d2-fafe7374cd85/640/96b5fb57-71c8-4c6b-b5d2-fafe7374cd85.png)
应用
来自组织溶梭菌的胶原酶用于：
- 从胶原蛋白支架中收获骨肉瘤143B细胞
- 胰岛和颈动脉的组织消化
- 绒毛膜绒毛的消化
- 基于ATP的肿瘤化学敏感性测定（ATP-TCA）中实体瘤的酶促解离
生化/生理作用
组织溶梭菌产生两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它能够在胶原蛋白三螺旋中的多个切割位点进行切割。它与气性坏疽中的细菌入侵有关。
从组织中有效释放细胞需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔酶可被4克原子钙（Ca2+）活化。培养物滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶，分子量范围为68-130kDa。最适pH为6.3-8.8。该酶通常用于消化组织样品中的结缔组分，以释放单个细胞。胶原酶处理可导致一些细胞死亡。通常使用0.1-5 mg/mL的浓度进行消化。反应持续时间从15分钟到几小时不等，以产生令人满意的细胞解离效率，同时又不会引起太多的细胞死亡。含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液是首选，并且需要添加Zn2+以确保活性。在测试中，对于每个大鼠肝脏，使用该酶以约1 mg/mL的浓度、总体积100mL释放肝细胞。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元（CDU）从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸，5小时，pH7.4,37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分钟水解1.0 μmole BAEE。
底物
警示用语：
Danger
危险分类
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
靶器官
Respiratory system
WGK
WGK 1
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
个人防护装备
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
法规信息
常规特殊物品
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实验方案
在测定胶原酶活性时，使用N-（3-[2-呋喃基]丙烯酰基）-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。
To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
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